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第43卷第2期        赖娅娜，曾文滔. 一种高效的成年小鼠同步诱导多细胞胚胎及受精卵的双排卵实验方案［J］.
                  2023年2月                     南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（2）：213-217                        ·217 ·


                                                                  来获得受精卵，有 15 只二次见栓鼠共收集到卵子
                                                                  735 枚中有 509 枚为受精卵，69.2%的受精率与 Luo
                                                A                 等 ［10］ 的正常小鼠超排受精率结果相近，说明二次超
                                                                  排卵子为正常可受精的卵子。本研究提供的优化
                                                                  双排卵实验方案增加了小鼠排卵的数量，在很大程
                                          B
                                                                  度上减少了使用的小鼠数量，对动物福利和科研成
                                                                  本节约具有深远意义。

                   A：正常超排输卵管壶腹部；B：双排卵第二次排卵的壶腹部明显                 ［参考文献］
                大于正常超排壶腹部。
                                                                 ［1］ MOCHIDA K. Development of assisted reproductive tech⁃
                   图4 正常超排和双排卵第二次排卵的壶腹部对比
                Figure 4  Comparison of ampulla between conventional   nologies in small animal species for their efficient preser⁃
                         superovulation and second double ovulation    vation and production［J］. J Reprod Dev，2020，66（4）：
                                                                       299-306
                胚胎（平均2枚），说明在雌鼠接受外源激素注射后，                         ［2］ HANSEN P J. Implications of assisted reproductive tech⁃
                小鼠体内自然受孕产生的受精卵在胚胎发育过程中                                 nologies for pregnancy outcomes in mammals［J］. Annu
                受到严重的抑制。为了更大程度上提高雌鼠超排效                                 Rev Anim Biosci，2020，8：395-413
                果，明确一次胚胎（自然产生的受精卵）减少的原因，                         ［3］ HEYKANTS M，SCHERB H，MICHEL G，et al. Influence
                本研究小组观察了自然交配见栓鼠在注射PMSG不                                of polygamous versus monogamous mating on embryo pro⁃
                                                                       duction in four different strains of mice after superovulato⁃
                同时间节点输卵管内胚胎数量的变化。结果发现，在
                                                                       ry treatment［J］. Theriogenology，2018，114：85-94
                PMSG注射后伴随32~48 h壶腹部消失，仅极少量胚
                                                                 ［4］ 白    雪，刘   露，胡    月，等. Zfp212基因敲除小鼠模型
                胎停留在原壶腹部位置，近子宫端输卵管和子宫内均                                的建立和雌性生殖表型研究［J］. 南京医科大学学报
                无胚胎。本项研究表明，HCG的注射时间与壶腹部                               （自然科学版），2022，42（3）：309-316
                的状态对自然受孕一次胚胎的发育有密切关系。                            ［5］ 尚彦星，周       蒙，鄂裘恺，等. 神经损伤诱导蛋白2在卵
                    通过改良的二次超排方案，将超排时间改为见                               巢发育中的作用［J］. 南京医科大学学报（自然科学
                栓当日9：00注射PMSG，并将HCG的注射时间提前                             版），2021，41（4）：477-482
                到次日16：00注射（与PMSG注射间隔缩短至31 h）。                    ［6］ LI R，LI E，KAMILI G，et al. Effect of resveratrol on super⁃
                调整后，优化双排实验组平均每只鼠收集到自然排                                 ovulation in mice［J］. Biomed Pharmacother，2022，146：
                                                                       112565
                卵发育而来的 8 细胞胚胎 11.7 枚，显著多于常规双
                                                                 ［7］ TAKEO T，MUKUNOKI A，NAKAGATA N. Ovulation of
                排卵实验组（2 枚）。第二次超排 18 只鼠均有排卵，
                                                                       juvenile，mature，and aged female C57BL/6 mice follow⁃
                共收集到卵子 838 枚，平均每只鼠产生 46.6 枚卵
                                                                       ing coadministration of inhibin antiserum and equine cho⁃
                子。18只鼠前后两次排卵合计收集到1 110枚卵子                              rionic gonadotropin［J］. Theriogenology，2019，135：1-6
                和胚胎（平均每只高达61.7枚），数量分别较自然排                        ［8］ LUCIANO A M，FRANCIOSI F，BARROS R G，et al. The
                卵组（平均15.1枚）、随机超排组（平均16.6枚）和常                           variable success of in vitro maturation：can we do better?

                规双排卵组（平均31.8枚）提高了307.23%、272.12%                      ［J］. Anim Reprod，2018，15（Suppl 1）：727-736
                和94.23%。其中有1只鼠二次排卵总数高达109枚，                      ［9］ AVERINA O A，VYSOKIKH M Y，PERMYAKOV O A，
                是同龄雌鼠自然排卵的 7~13 倍。在不同时期对胚                              et al. Simple recommendations for improving efficiency in
                                                                       generating genome⁃edited mice［J］. Acta Naturae，2020，
                胎观察发现，对照组与实验组一次排卵胚胎在 8 细
                                                                       12（1）：42-50
                胞前发育同步（图3），在囊胚期实验组处于3级扩张
                                                                 ［10］ LUO C，ZUÑIGA J，EDISON E，et al. Superovulation strat⁃
                期要晚于对照组，实验组胚胎受 PMSG 的影响一直
                                                                       egies for 6 commonly used mouse strains［J］. J Am Assoc
                停留在输卵管，发育差距可能是受到不同微环境的                                 Lab Anim Sci，2011，50（4）：471-478
                影响。为了评价二次超排募集到的卵子是否具有                                                       ［收稿日期］ 2022-10-29
                受精能力，本研究对优化后的实验组采用自然交配                                                          （本文编辑：唐      震）
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