Page 11 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第3期 王伟民，赵晨卉，倪思琦，等. ZBTB3表达对胶质母细胞瘤细胞增殖和克隆形成的调控［J］.
2023年3月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（3）：297-303 ·301 ·

A B 1.5 C
shZBTB3⁃2
shZBTB3⁃2
ZBTB3相对表达量
shCTR shZBTB3⁃1 shZBTB3⁃3 shCTR shZBTB3⁃1 shZBTB3⁃3
ZBTB3 —572 bp 1.0 ZBTB3 —62 kDa
GAPDH —496 bp 0.5 ** β⁃actin —42 kDa
0
shZBTB3⁃1
shCTR shZBTB3⁃2
shZBTB3⁃3
D 1.5 E 1.5 F shCTR shZBTB3 G （ 个/皿 ） 200
ZBTB3蛋白相对表达量 1.0 ** nm ） （ 450 D 1.0 ** 细胞克隆数 150 **

100
0.5
0.5
50
0
shZBTB3⁃3
shZBTB3⁃1
shCTR shZBTB3⁃2 0 shCTR shZBTB3 0 shCTR shZBTB3
A、B：RT⁃PCR（A）和qPCR（B）定量检测ZBTB3的mRNA表达水平；C、D：Western blot检测ZBTB3的蛋白表达量（C：Western blot电泳条带；D：
半定量分析柱形图）；E：CCK⁃8检测细胞增殖水平；F：结晶紫染色观察克隆形成；G：克隆形成实验统计图。与shCTR转染组比较，P < 0.01（n=3）。
**
图2 沉默ZBTB3对U87细胞增殖和克隆形成的影响
Figure 2 Effects of ZBTB3 silencing on U87 cell proliferation and clonal formation

A DMSO + - - - B p⁃p38 C
Compound C
SB203580 - + - - 1.5 p⁃AMPK SB203580 Perifosine
蛋白相对表达量
Compound C - - + - p⁃Akt1 DMSO
Perifosine - - - + 1.0 ZBTB3 —572 bp
p⁃p38 —40 kDa
t⁃p38 —40 kDa 0.5 ** ** ** GAPDH —496 bp
p⁃AMPK —63 kDa 0
DMSO
t⁃AMPK —63 kDa SB203580 Compound C Perifosine
p⁃Akt1 —60 kDa
t⁃Akt1 —60 kDa
β⁃actin —42 kDa

D 1.5 E SB203580 Perifosine F 1.5
Compound C
ZBTB3 mRNA相对表达量 1.0 ** ZBTB3 DMSO —62 kDa ZBTB3蛋白相对表达量 1.0

0.5
0.5
0 β⁃actin —42 kDa 0 **
SB203580
DMSO Compound C Perifosine DMSO Compound C Perifosine
SB203580
A、B：Western blot检查p38MAPK、AMPK、Akt1的磷酸化水平（A：Western blot电泳条带；B：半定量分析柱形图）；C、D：RT⁃PCR（C）和qPCR
（D）检测 ZBTB3 的 mRNA 表达丰度；E、F：Western blot 检测 ZBTB3 的蛋白表达水平（E：Western blot 电泳条带；F：半定量分析柱形图）。与
DMSO处理组比较，P < 0.01（n=3）。
**
图3 p38MAPK、AMPK和Akt1抑制剂对U87细胞ZBTB3表达的影响
Figure 3 The effects of p38MAPK，AMPK and Akt1 inhibitors on ZBTB3 expression in U87 cells

瘤。迄今为止，GBM的发病机制尚未阐明。业已发 IL⁃6再介导STAT3活化，从而促进GBM的增殖和侵
现，转录因子的表达和信号分子的活化对于GBM发 袭。Nie等 ［19］ 报道，STAT3可与SH3结构域结合富含
生、发展有重要作用。例如，McFarland 等 ［18］ 研究表 谷氨酸的蛋白质样因子 3（SH3BGRL3）基因的启动
明，转录因子NF⁃κB可上调IL⁃6基因的表达，产生的 子结合，增加 SH3BGRL3 基因的转录与表达，上调