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第43卷第3期 阮玉婷，李 雅，葛 文，等. LINC01518对IL⁃17诱导非小细胞肺癌细胞增殖的影响［J］.
2023年3月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（3）：304-310 ·309 ·

A 2.5 ** ▲▲ B pcDNA3.1 pcDNA3.1/LINC01518 shCTR shCTR+IL⁃17 shLINC01518+IL⁃17
nm ） 2.0 ##
1.5
（ 450 D 1.0 EdU
0.5
0 shCTR
pcDNA3.1
shLINC01518+IL⁃17
pcDNA3.1/LINC01518 shCTR+IL⁃17

C 40 ** ▲▲ Hoeehst
EdU标记细胞的 （ % ） 阳性率 30 0 ## Merge

20
10

pcDNA3.1/LINC01518 shCTR+IL⁃17
shCTR
shLINC01518+IL⁃17
pcDNA3.1

（ 个/皿 ） 200 ** ▲▲
D E
pcDNA3.1 pcDNA3.1/LINC01518 shCTR shCTR+IL⁃17 shLINC01518+IL⁃17
细胞克隆形成数 100 0 ##
150
50
pcDNA3.1/LINC01518 shCTR+IL⁃17
shCTR
pcDNA3.1
shLINC01518+IL⁃17

A：CCK⁃8实验显示，过表达LINC01518后48 h，细胞增殖水平明显升高，而沉默LINC01518后由IL⁃17诱导的细胞增殖未见显著升高。B、
C：EdU测定发现，过表达LINC01518后48 h，进入增殖期的细胞数明显增多，而沉默LINC01518后由IL⁃17诱导进入增殖期的细胞数增加并不
显著［B：镜下照片（×200）；C：各组EdU阳性细胞百分比统计图］。D、E：克隆形成实验表明，过表达LINC01518后8 d，细胞克隆数显著增加，而
沉默shLINC01518后8 d，由IL⁃17刺激诱导形成的细胞克隆数并未明显增多（D：实验代表照片；E：各组细胞克隆数定量分析图）。与pcDNA3.1比
较，P < 0.01；与shCTR比较， P < 0.01；与shCTR+IL⁃17比较，P < 0.01。
##
▲▲
**
图4 过表达和沉默LINC01518基因对H1299细胞增殖的影响
Figure 4 The effects of overexpressing and silencing LINC01518 gene on the proliferation of H1299 cells

的可能机制，本课题组前期已用 LncRNA 芯片筛 则可作为竞争性内源 RNA（competing endogenous
查了 IL⁃17 刺激 3 h 后 H1299 和 PC9 细胞差异表达 RNA，ceRNA）结合相应的 miRNA，进而在转录后能
的LncRNA。结果发现，上调≥2 倍的 LncRNA 共有 间接调控靶基因 ［8-10，12-13，15-18］ 。研究发现，LINC01518
459 个。查阅相关文献 ［7-18］ ，并结合芯片中上调较高 在食管癌细胞中的过量表达能通过 ceRNA 结合
（≥3 倍）的 LncRNA，从中选取了10条与细胞增殖有 miR⁃1⁃3p促进细胞增殖 ［11-12］ 。然而LINC01518是否参
关的LncRNA，先用RT⁃PCR测定IL⁃17刺激3 h时两种 与IL⁃17诱导的NSCLC细胞增殖，目前尚无文献报道。

细胞mRNA的水平，在筛出了LINC01518、LINC00265 本研究构建了 LINC01518 过表达（pcDNA3.1/
和 PSMA3⁃AS1 升高显著后，又用 Real⁃time PCR 进 LINC01518）和 shLINC01518 小干扰质粒。在验证
一 步 确 定 前 述 3 个 表 达 水 平 升 高 的 LncRNA， 上述质粒构建成功后，分别将这些质粒转染 H1299
LINC01518的上调倍数既明显又相对稳定。 细胞（转染 shLINC01518 质粒的细胞再行 IL⁃17 刺
LINC01518 位于人染色体 10q11.21，其细胞定 激）。结果显示，过表达LINC01518能显著提高细胞
位和功能研究发现，细胞核中的 LncRNA 多与染色 的增殖水平，而敲低LINC01518基因后由IL⁃17诱导
质修饰、转录调节等过程相关，而细胞质中的LncRNA 的 细 胞 增 殖 未 见 明 显 增 加 。 这 一 结 果 提 示 ，