Page 18 - 南京医科大学学报自然科学版
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第43卷第3期
·308 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年3月
A B
OIP5⁃AS1
H1299 LINC01518 三三三三
三三三三
SNHG17
0 h 1 h 2 h 3 h 6 h 12 h 0 h 1 h 2 h 3 h 6 h 12 h LINC00265 丐丐丐丐
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NUTM2A⁃AS1
LINC01518 OIP5⁃AS1 6 PSMA3⁃AS1 一一一一 **
三三三三
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LINC01194
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DLGAP1⁃AS1 三三三三
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LINC00265 SNHG17 一一一一 丐丐丐丐
PSMA3⁃AS1 NUTM2A⁃AS1 2 的相对表达量 4 一一一一 丐丐丐丐 ** **
**
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LINC01347 LINC01194
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GAPDH GAPDH 0 一一一一三三三三丐丐丐丐三三三三丐丐丐丐一一一一 丐丐丐丐一一一一三三 一一一一 丐丐丐丐 一一一一 丐丐丐丐
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0 h 1 h 2 h 3 h 6 h
H1299
C D
OIP5⁃AS1
PC9 LINC01518 三三三三
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0 h 1 h 2 h 3 h 6 h 12 h 0 h 1 h 2 h 3 h 6 h 12 h LINC00265 三三三三
SNHG17
PSMA3⁃AS1 丐丐丐丐
NUTM2A⁃AS1
LINC01518 OIP5⁃AS1 2.5 LINC01347 一一一一
三三三三
一一一一
mRNA的相对表达量
LINC01194
DLGAP1⁃AS1 三三三三
BBOX1⁃AS1
LINC00265 SNHG17 2.0 一一一一 丐丐丐丐
PSMA3⁃AS1 NUTM2A⁃AS1 1.5 一一一一 丐丐丐丐
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LINC01347 LINC01194 1.0 一一一一三三三三丐丐丐丐一一一一三三三三丐丐丐丐 一一一一 丐丐丐丐 一一一一 三三三三 丐丐丐丐
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三三三三 2 h
0 h 1 h 丐丐丐丐 一一一一 3 h 丐丐丐丐 6 h 三三
PC9
E 6 LINC01518 F 6 LINC01518
2 的相对表达量 4 PSMA3⁃AS1 ** ** ** 2 的相对表达量 4 PSMA3⁃AS1
LINC00265
LINC00265
mRNA 0 mRNA 0
0 h 1 h 2 h 3 h 6 h 0 h 1 h 2 h 3 h 6 h
A、B：RT⁃PCR测定显示，IL⁃17刺激H1299细胞后不同时间，LINC01518、LINC00265和PSMA3⁃AS1升高较为明显（A：电泳照片，B：半定量
分析图，n=3）。C、D：RT⁃PCR测定显示，IL⁃17刺激PC9细胞后不同时间，LINC01518、LINC00265和PSMA3⁃AS1升高较为明显（C：电泳照片，D：
半定量分析图，n=3）。E、F：Real⁃time PCR 进一步检测上升明显的 LncRNA 发现，IL⁃17 刺激 H1299 细胞（E）和 PC9 细胞（F）后，LINC01518、
LINC00265和PSMA3⁃AS1的表达在IL⁃17刺激后2 h和3 h时均有升高，但以H1299细胞较为显著（与0 h比较，P < 0.05，P < 0.01，n=3）。
**
*
图2 IL⁃17刺激H1299和PC9细胞后不同时间LncRNA芯片上调明显的10个LncRNA的表达验证
Figure 2 The expression validation of 10 up⁃regulated lncRNAs from the microarray in IL⁃17⁃stimulated H1299 and PC9
cells at different times
A C D
pcDNA3.1/LINC01518
A C D
mRNA 15 ** mRNA 1.5 **
1.0
10
LINC01518 的相对表达量 5 LINC01518 的相对表达量 0.5
0
shLINC01518⁃2
shCTR
pcDNA3.1/LINC01518 shLINC01518⁃1 shLINC01518⁃3
B shLINC01518⁃1 shLINC01518⁃2 shLINC01518⁃3 pcDNA3.1 0.0
A：LINC01518过表达质粒测序图谱（部分）；B：shLINC01518质粒测序图谱（部分）；C：H1299细胞转染过表达质粒后48 h，其LINC01518的
**
表达明显增加（两组比较，P < 0.01，n=3）；D：H1299细胞中转染shLINC01518⁃1~3质粒48 h再行IL⁃17刺激3 h发现，shLINC01518⁃1抑制IL⁃17
上调LINC01518的效果最佳（两组比较，P < 0.01，n=3）。
**
图3 LINC01518过表达质粒的表达验证和shLINC01518质粒沉默效率的检测
Figure 3 The determination of pcDNA3.1/LINC01518 expression and screening of most effective shRNA for silencing
LINC01518
