Page 48 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第8期
·1082 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2023年8月

5A、B）。IRF2 siRNA 显著下调 cIAP1 的 mRNA 和蛋 中MVP发挥的作用及潜在机制等进行了探索，揭示
白表达水平（图5C~E）。 MVP 在 HAEC 细胞增殖与凋亡功能中发挥的作用，
流式检测IRF2对HAEC凋亡的影响。结果显示， 即 MVP 抑制 TNF⁃α诱导的 HAEC 凋亡，促进其增
IRF2敲降后HAEC凋亡大量升高，表现为Annexin V 殖。后续研究发现，MVP可通过上调IRF2、cIAP1表
结合细胞数增多和Caspase 3活性的升高（P < 0.05， 达而抑制 HAEC 凋亡。这些结果为阐明 MVP 保护
图5F、G）。 内皮细胞的具体机制提供部分线索，给临床诊治相
进一步研究显示，敲降 IRF2 明显逆转过表达 关疾病带来启发。
MVP 导致的 cIAP1 表达升高（P < 0.05，图 5H、I）和 MVP 最初在肿瘤与肿瘤耐药中被广泛研究。
HAEC凋亡抑制（P < 0.001，图5J）。 研究发现，MVP 能抑制 PTEN，促进 PI3K/AKT 途径
介导的细胞增殖；MVP也能通过增强ERK/MAPK磷
3 讨 论
酸化水平介导肝癌细胞增殖 ［9-10］ 。MVP与细胞凋亡
EC 生存与死亡动态平衡被危险因素打破造成 的调控关系也十分密切。研究表明，MVP能通过调
内皮损伤，被认为是动脉粥样硬化等多种血管疾病 控蛋白激酶p38抑制凋亡信号 ［11］ 。最新一项研究表
发生的始动环节 。近年来研究发现，MVP在血管平 明 MVP 通过与 IRF2 互作破坏 IRF2⁃HDM2 复合物，
［8］
滑肌细胞增殖活性的调控中发挥着重要的保护作用， 释放的 HDM2 导致 p53 降解和转录失活，从而增加
而巨噬细胞中的MVP可减弱IKK⁃NF⁃κB通路介导的 肝癌细胞增殖活性和凋亡耐受性 ［12］ 。MVP 不仅参
［7］
炎症而抑制动脉粥样硬化与肥胖 。本研究对HAEC 与细胞内信号转导、核质药物运输，在先天免疫、病
A B Lenti⁃con C
IRF2蛋白相对表达量 （ % of si⁃NC）
TNF⁃α - - + + 1.5 150
Lenti⁃MVP - + - + Lenti⁃MVP ** ***
*
IRF2 50 kDa 1.0 mRNA水平 100
GAPDH 37 kDa 0.5 IRF2 50

0.0
Control TNF⁃α 0 si⁃NC si⁃IRF2
D E F G
150 si⁃NC si⁃IRF2 si⁃NC si⁃NC
mRNA水平 （ % of si⁃NC） 100 ** IRF2 50 kDa 250 ** * （ % of si⁃NC） 200 * *
si⁃IRF2
si⁃IRF2
200
150
cIAP1
cIAP1 50 GAPDH 62 kDa （ % of si⁃NC） 150 100
37 kDa
100
0 50
si⁃NC si⁃IRF2 AV阳性 50 Casapse3活性
0
Control TNF⁃α 0 Control TNF⁃α
H I J
TNF⁃α - - - + + +
* * Lenti⁃con si⁃IRF2 - - + - - + *** Lenti⁃con
mRNA水平 （ % of Lenti⁃con） 300 Lenti⁃MVP Lenti⁃MVP - + + - + + 62 kDa AV阳性 （ % of Lenti⁃con） 300 *
Lenti⁃MVP
200
200
cIAP1
cIAP1 100 β⁃actin 42 kDa 100
0 0
TNF⁃α + + + TNF⁃α + + +
si⁃IRF2 - - + si⁃IRF2 - - +
A、B：Western blot 检测过表达 MVP 后 IRF2 蛋白表达（n=4）；C：荧光定量 PCR 验证 IRF2 敲降效率（n=3）；D、E：检测 IRF2 敲降对 cIAP1 的
mRNA（D）和蛋白（E）水平的影响（n=3）；F、G：流式细胞术检测敲降IRF2后细胞的Annexin V结合（F）和Caspase 3活性（G）（n=3）；H、I：荧光定
量 PCR（H）和 Western blot（I）检测敲降 IRF2 对 MVP 过表达细胞中 cIAP1 表达的影响（n=3）；J：流式细胞术检测敲降 IRF2 对 MVP 过表达细胞
Annexin V结合阳性率的影响（n=3）。两组比较，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001。
*
***
**
图5 MVP通过上调IRF2蛋白介导cIAP1转录表达升高，抑制HAEC凋亡
Figure 5 MVP promoted cIAP1 transcriptional expression by up⁃regulating IRF2 protein expression thereby inhibiting⁃
HAEC apoptosis