Page 13 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第9期 邓 惠，陈格格，徐 莉，等. 4⁃羟基水杨酰苯胺对T淋巴细胞白血病肿瘤增殖与凋亡的影响［J］.
2023年9月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（9）：1185-1193 ·1191 ·

A B
Jurkat Hut⁃78
γ⁃H2AX DAPI Merge γ⁃H2AX DAPI Merge
μmol/L μmol/L

0 0

μmol/L μmol/L

100 100

μmol/L μmol/L

300 300

C D E Jurkat Hut⁃78
（ AU ） 200 *** （ AU ） 150 *** γ⁃H2AX 0 100 300 0 100 300 HDS（μmol/L）
Jurkat平均荧光强度 250 *** Hut⁃78平均荧光强度 200 *** p⁃CHK1 -54 kDa
-15 kDa
150
100
100
50
CHK1
-54 kDa
50
0
0
100
100
HDS（μmol/L） 300 0 0 HDS（μmol/L） 300 p⁃CHK2 -62 kDa
CHK2
-62 kDa
GAPDH -37 kDa
F G
Jurkat Hut⁃78
0 μmol/L HDS *** *** *** *** 0 μmol/L HDS
蛋白相对表达量 3 2 1 *** *** *** 300 μmol/L HDS 蛋白相对表达量 3 2 1 *** *** 300 μmol/L HDS
***
***
***
100 μmol/L HDS
100 μmol/L HDS
0 0
γ⁃H2AX p⁃CHK1 CHK1 p⁃CHK2 CHK2 γ⁃H2AX p⁃CHK1 CHK1 p⁃CHK2 CHK2
A、B：用HDS（0、100、300 μmol/L）处理Jurkat（A）和Hut⁃78细胞（B）48 h，免疫荧光法标记γ⁃H2AX，共聚焦显微镜检测γ⁃H2AX阳性细胞比例，
γ⁃H2AX 阳性细胞呈绿色（比例尺：200 μm）；C、D：用 Image J 计算 Jurkat（C）和 Hut⁃78（D）细胞的γ⁃H2AX 阳性细胞的平均荧光强度，与0
***
μmol/L HDS处理组比较， P < 0.001（n=5）；E：100、300 μmol/L HDS处理Jurkat和Hut⁃78细胞后，Western blot检测细胞CHK1、p⁃CHK1、CHK2、p⁃
CHK2和γ⁃H2AX的蛋白水平；F、G：对Jurkat细胞（F）和Hut⁃78细胞（G）各蛋白表达的灰度值分析，与0 μmol/L组比较， P < 0.001（n=3）。
***
图4 HDS可通过CHK1/CHK2信号通路阻断T淋巴细胞白血病细胞的DNA损伤修复过程
Figure 4 HDS can block the DNA damage repair process of T⁃lymphoblastic leukemia cells through the CHK1/CHK2 sig⁃
naling pathway
［20-21］
HDS 是一种与核糖核苷酸还原酶亚单位 M2 Cdc25A 。ATM/ATR 可以反映 DNA 损伤，并将
（ribonucleotide reductase small subunit M2，RRM2）受 信号传递给其下游分子CHK2/CHK1，最终导致细胞
体竞争结合的RNR抑制剂。RNR在DNA损伤修复 周期停滞或凋亡 ［22-23］ 。
中发挥关键作用 ［16］ 。此外，关于HDS在其他类型肿 为了进一步验证药物的有效性和安全性，建立
瘤中的研究也很多，如肝细胞癌 ［13］ 。研究认为，HDS 了 T 淋巴细胞白血病异种移植小鼠模型。在体内，
可能会干扰DNA损伤修复过程。γ⁃H2AX染色结果 HDS可以抑制小鼠T淋巴细胞白血病肿瘤细胞的增
显示，经 HDS 处理的细胞 DNA 损伤加重。蛋白免 殖，诱导肿瘤细胞凋亡，从而增加肿瘤组织坏死，但

疫印迹结果显示，HDS 处理上调了 p⁃CHK1 和 p⁃ 对小鼠的心脏、肝脏等其他器官没有明显影响，表
CHK2 的表达。CHK2 是一种位于 DNA 损伤检查点 明 HDS 对 T 淋巴细胞白血病肿瘤具有杀伤作用，且
的限速蛋白，可以指导与 S 期细胞周期停滞相关的 无明显毒性。结合体外实验数据，表明HDS可有效