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第44卷第8期 郭小瑭，卢席缘，李聚学. 氟化聚乙烯亚胺衍生物构成的胶束载体的构建、表征及其在跨血⁃脑屏障
2024年8月 递送中的作用研究［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2024，44（8）：1035-1043 ·1041 ·

2.5 SPFT质粒复合体具有高效的体外细胞转染效率 治疗中的应用。使用FITC标记SPFT，并用其搭载无
HEK293FT 细胞作为经典的细胞转染模型，常 荧光标记的质粒lentiCRISPR v2，分别在添加后2、4、
用于研究外源基因表达。使用载体搭载含增强型 6 h进行显微镜观察。SPFT在4 h可进入HEK293FT
GFP基因的质粒pLL3.7对HEK293FT细胞进行转染 细胞内，其与质粒形成的复合体在细胞中的内吞具有
实验。SPF 和 SPFT 的转染效率远优于 PEI25k，且 时间依赖性，随着时间的延长，内吞量也增加（图3C）。
SPFT 与质粒的质量比为4.0时表现出最佳转染效果 2.7 SPFT质粒复合体具有良好的生物相容性
（图3A）。考虑到SPFT有更好的穿透BBB的能力以及 根据国家标准 GB/T16886⁃1，选用溶血实验评
潜在的毒性更低，认为SPFT是更优的基因载体材料。 价材料的生物相容性，SPFT 浓度≤0.200 mg/mL 时
为了进一步评估SPFT作为基因载体的转染效果，在相 溶血率<5%（图 3D），符合生物材料的溶血实验要
同条件下、使用相同载体质粒质量比对小鼠脑神经瘤 求 ［19］ 。从细胞毒性上来看，CCK⁃8 实验结果显示，
细胞 Neuro 2a 进行转染实验。与 PEI25k/pLL3.7 组相 无论 SPF 还是 SPFT，其毒性都远低于 PEI25k，当浓
比，SPFT/pLL3.7在质量比为4.0的条件下对小鼠脑神 度≥10.0 μg/mL 时，SPFT 的细胞相容性明显高于
经瘤细胞也表现出良好的转染效果（图3B）。 SPF组（图3E）。

2.6 SPFT质粒复合体能够实现细胞内吞 2.8 SPFT质粒复合体能够靶向小鼠脑内
了解纳米载体质粒复合体进入细胞的时间点有 为了进一步研究 SPFT 质粒复合体在生物体内
助于确定最合适的转染时机，从而优化该载体在基因 的靶向效果，合成SPFT⁃Cy5.5并通过尾静脉注射的

A wt/wt=2.0 wt/wt=3.0 wt/wt=4.0 C GFP DAPI Merge
PEI25k/pLL3.7 h 2

SPF/pLL3.7

4 h
SPFT/pLL3.7

h
6
B
PEI25k/pLL3.7 SPFT/pLL3.7

D E
PFI25k
15
GFP （%） 10 1.5 SPF
SPFT
Hemolysis ratio 5 （450 nm） 1.0

0.5
DAPI 0 D
9.000 3.000 0.500 0.200 0.100 0.050 0.020 0.010 0.005 0.001 0 1.0 5.0 10.0 12.5
Concentration of SPFT（mg/mL） Concentration（μg/mL）
A：Transfection capability of PEI 25k/pLL3.7，SPF/pLL3.7，and SPFT/pLL3.7 at various mass ratios in HEK293FT（Scale bar=80 μm）. wt/wt：the
weight of polymer/the weight of plasmid（pLL3.7）. B：Transfection capability of PEI 25k/pLL3.7 and SPFT/pLL3.7 in Neuro 2a（Scale bar=80 μm）. C：Cellular
uptake of SPFT/lentiCRISPR v2 at 2 h，4 h，and 6 h after the transfection in HEK293FT cells（Scale bar=20 μm）. D：Analysis of hemolytic properties of
SPFT at various mass concentrations. E：CCK⁃8 assay of PEI25k，SPF，and SPFT at various mass concentrations. Values were presented as x ± sx （n=3）.
图3 SPFT质粒复合体的细胞体外实验
Figure 3 Cellular in vitro assay of SPFT with plasmids