Page 11 - 南京医科大学学报自然科学版

第42卷第12期 董汇昱，周天任，赵旭嵩，等. 奥拉帕利联合恩杂鲁胺协同抑制前列腺癌细胞生长的机制研究［J］.
2022年12月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（12）：1643-1650，1672 ·1647 ·

A
DMSO ENZ OLA ENZ+OLA

B 100 **** C 1.5 DMSO
克隆形成相对数量 （ % ） 50 **** 相对增殖水平 2.0 OLA
****
ENZ
1.0
ENZ+OLA
0.5
0
DMSO ENZ OLA 0.0 0 24 48 72 96
ENZ+OLA
时间（h）
A~B：在 C4⁃2 中联合使用 ENZ 和 OLA 对比单药对细胞克隆的影响与柱状统计图；C：在 C4⁃2 中联合使用 ENZ 和 OLA 对比单药的增殖曲
线。两组比较， P < 0.0001。
****
图2 在前列腺癌细胞系C4⁃2中联合使用ENZ和OLA对增殖的影响
Figure 2 Proliferative effects of combined ENZ and OLA in C4⁃2 cell line

γH2AX 的出现，γH2AX 会出现在细胞核内围绕损 4B）。研究发现联合用药后不仅出现γH2AX细胞的
伤点聚簇 ［15］ 。使用免疫荧光检测前列腺癌细胞系 比例显著提高，γH2AX出现在细胞核中的焦点数量
C4⁃2 中γH2AX 的表达情况，发现在 C4⁃2 细胞中联 也明显增加，说明联合用药导致DSB积累显著增多。
合用药组其表达明显高于单独使用 ENZ 或 OLA 组 2.5 联合使用 ENZ 和 OLA 通过协同促进 TNF 通路
（图4A）。通过3次重复实验的400倍镜下免疫荧光 进而促进凋亡
图片计算γH2AX 出现细胞占总细胞的比例（图 细胞凋亡的开始阶段分为外源性及内源性，外

A DMSO ENZ OLA ENZ+OLA
10 4 10 4 10 4 10 4
Q1 Q2 Q1 Q2 Q1 Q2 Q1 Q2
1.89 6.34 1.94 9.02 1.45 14.9 4.37 20.2
10 3 10 3 10 3 10 3
C4⁃2 10 2 10 2 10 2 10 2 PI

10 1 10 1 10 1 10 1
Q4 Q3 Q4 Q3 Q4 Q3 Q4 Q3
89.9 1.89 80.6 8.45 74.2 9.41 67.5 7.94
10 0 10 0 10 0 10 0
10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4 10 0 10 1 10 2 10 3 10 4
Annexin V FITC
B ** C
（ % ） 40 * cleaved⁃caspase 3 DMSO ENZ OLA ENZ+OLA
30
—19 kDa
凋亡比例 20 cleaved⁃caspase 9 —37 kDa
—17 kDa
10
0 cleaved⁃PARP —25 kDa
DMSO ENZ OLA β⁃actin —43 kDa
ENZ+OLA

A、B：流式细胞仪检测联合使用ENZ和OLA对比单药后前列腺癌细胞系C4⁃2的细胞凋亡比例（A）及柱状图（B）；C：联合使用ENZ和OLA
对比单药后在C4⁃2细胞系中凋亡标志物cleaved⁃caspase 3、cleaved⁃caspase 9、cleaved⁃PARP的蛋白表达情况。两组比较，P < 0.05，P < 0.01。
*
**
图3 联合使用ENZ和OLA对前列腺癌细胞C4⁃2凋亡的影响
Figure 3 Effects of combined use of ENZ and OLA on apoptosis of C4⁃2 cell line