Page 16 - 南京医科大学自然版

第45卷第1期
· 10 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2025年1月

A B C
150 NC Vector NLRP3 OE NC Vector IKKβ OE
（%） 100 ** ** NLRP 144 kDa IKKβ 87 kDa
Cell viability 50 β⁃actin * 42 kDa β⁃actin ** 42 kDa
0.4
0.6
NLRP/β⁃actin
0 0.3 0.4
0 4 8 16 32 64 128 256（μmol/L） 0.2 IKKβ/β⁃actin 0.2
0.1
0.0 0.0
D E F
8 000 *** && 3 000 & 6 000 *** & &&
（pg/mL） 6 000 ### && （pg/mL） 2 000 *** & （pg/mL） 4 000 ###

4 000
TNF⁃α 2 000 IL⁃1β 1 000 # IL⁃6 2 000

0 0 0
LPS/ATP +LPS/ATP+MON LPS/ATP +LPS/ATP+MON LPS/ATP +LPS/ATP+MON
NC NC NC
LPS/ATP+MON
+LPS/ATP+MON
LPS/ATP+MON
LPS/ATP+MON
+LPS/ATP+MON
+LPS/ATP+MON
NLRP3 OE IKKβ OE NLRP3 OE IKKβ OE NLRP3 OE IKKβ OE
A：CCK⁃8 assay was used to determine the safe concentration of MON in HK⁃2 cells. B：Western blot was used to detect the expression levels of
NLRP3 protein in HK⁃2 cells transfected with pCMV⁃NLRP3（human）⁃3×FLAG⁃Neo plasmid（n=3）. C：Western blot was used to detect the expression
levels of IKKβ protein in HK⁃2 cells transfected with pCMV⁃Myc⁃Ikbkb（human）plasmid（n=3）. D-F：ELISA was used to measure the secretion levels
OE
OE
of TNF⁃α（D），IL⁃1β（E）and IL⁃6（F）in HK⁃2 cells of the NC，LPS/ATP，LPS/ATP+MON，NLRP3 +LPS/ATP+MON，and IKKβ +LPS/ATP+MON
**
###
*
groups（n=6）. Compared with the NC group，P < 0.05，P < 0.01，and *** P < 0.001；compared with the LPS/ATP group， P < 0.001；compared with the
&
&&
LPS/ATP+MON group，P < 0.05 and P < 0.01.
图8 MON对LPS/ATP刺激的HK⁃2细胞中炎症细胞因子分泌的影响
Figure 8 Effects of MON on the secretion of inflammatory cytokines in the LPS/ATP⁃stimulated HK⁃2 cells
本研究发现 CLP 导致血清 BUN 和 CRE 水平异常升 机体主要的抗氧化酶，可保护细胞免受氧化应激损
高，而MON可降低这些异常肾功能指标水平。S⁃AKI 伤。MON 的抗氧化作用已被多项研究证实，例如
小鼠的肾组织病理学改变具有高度异质性。大多 MON 通过降低 MDA 水平和增加 GSH、SOD 和 CAT
数病例不表现急性肾小管坏死，但肾组织可表现出 的活性来抑制顺铂诱导的氧化应激 ［19］ 。本研究结
从正常到严重异常的一系列变化，其中弥漫性肾炎症 果证实了 S⁃AKI 小鼠肾脏组织发生氧化应激，MON
［17］
是这一过程中的重要阶段 。本研究发现在S⁃AKI 可以通过增加 GSH、CAT 和 T⁃AOC 水平，抑制肾脏
小鼠模型中可见炎症细胞浸润的病理变化，而MON ROS和MDA积累发挥抗氧化应激作用。
可减轻肾组织病理学损伤。 炎症在脓毒症发病机制中起着至关重要的作
氧化应激是脓毒症并发多种器官功能障碍的 用，缓解炎症反应是治疗 S⁃AKI 的一种非常有效的
关键发病机制之一，在 S⁃AKI 中起着重要作用。脓 策略。大量研究报道，MON可在多种疾病模型中发
毒症会导致体内ROS的过度产生，持续增强的氧化 挥抗炎作用。例如，MON可以下调皮肤组织中的促
［20］
应激通过损耗内源性抗氧化酶，引发一系列如膜脂 炎细胞因子减轻特应性皮炎样皮肤炎症 。MON通
质过氧化等细胞结构和功能的破坏，最终导致肾组 过 AKT 通路减轻阿霉素诱导的心脏炎症和心功能
织的严重损伤 ［18］ 。MDA是脂质过氧化的最终产物， 不全 ［21］ 。脓毒症感染引发的全身炎症反应是一个
可用于评估细胞膜脂质过氧化水平。MDA 的含量 复杂的病理生理过程，脓毒症发病过程中会释放大
可以反映细胞损伤和机体氧化应激程度。谷胱甘 量炎性细胞因子，例如 TNF⁃α、IL⁃1β和 IL⁃6 等。这
肽过氧化物酶（glutathione peroxidase，GSH⁃Px）、超 些细胞因子通过触发一系列炎症反应和免疫调节
氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）和CAT是 过程，在脓毒症的发生和发展中发挥重要作用。