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南京医科大学学报（自然科学版） 第45卷第10期
·1386 · Journal of Nanjing Medical University（Natural Sciences） 2025年10月

·专题研究：神经退行性疾病·

脑痰清在AD小鼠神经干细胞增殖中的作用和机制

王景泽 ，李倩倩 ，弓玄伟 ，杨 依 ，侯 琳 ，王树坤 ，袁增强 1，2*
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2，4
2，3
2*
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1，2
青岛大学基础医学院，山东 青岛 266071；军事医学研究院，北京 100850；河北医科大学基础医学院，河北 石家庄
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050017；山西中医药大学基础医学院，山西 晋中 030619
4
［摘 要］ 目的：研究脑痰清（Nao Tan Qing，NTQ）对阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）小鼠中神经干细胞增殖的影响，
并探究其分子机制。方法：将五转家族性阿尔茨海默病模型小鼠（transgenic mice with five familial Alzheimer’s disease，5×FAD
小鼠）随机分为两组：AD组、AD+NTQ组，分别使用去离子水或NTQ灌胃处理；利用免疫荧光染色、实时荧光定量PCR、蛋白质
印迹法等检测海马区神经干细胞增殖情况；体外分离培养C57/BL6J小鼠胚胎神经干细胞，分别使用PBS、NTQ处理细胞，利用
CCK⁃8 法检测细胞增殖情况，TUNEL 检测细胞凋亡，使用免疫荧光染色检测 Y 染色体性别决定区（sex⁃determing region of Y
chromosome，SRY）盒转录因子2（SRY⁃box transcription factor 2，SOX2）阳性、5⁃溴脱氧尿嘧啶核苷（5⁃bromo⁃2⁃deoxy uridine，BrdU）阳
性及双皮质素（doublecortin，DCX）阳性细胞，通过实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测SOX2、DCX表达。利用实时荧光定
量PCR及蛋白质印迹法检测cyclin D1、p27/Kip1及GATA2的表达情况；使用cyclin D1⁃细胞周期依赖性蛋白激酶（cyclin⁃depen⁃
dent kinase，CDK）抑制剂体外处理神经干细胞后，通过实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测SOX2表达水平。结果：与AD
组相比，AD+NTQ组小鼠海马区SOX2 细胞数量增多、SOX2 mRNA及蛋白水平显著增加；NTQ处理神经干细胞后，神经球直径
+
显著增加，BrdU 、SOX2 及DCX 细胞数目增加，SOX2、DCX mRNA 水平增加，SOX2蛋白水平显著增加。AD+NTQ 组小鼠海马
+
+
+
区GATA2及下游分子p27/Kip1表达下降，对cyclin D1的抑制作用减弱，使细胞发生增殖。添加cyclin D1⁃CDK抑制剂可减弱
NTQ所引发的SOX2、DCX表达量增加。结论：NTQ通过调控GATA2⁃p27/Kip1⁃cyclin D1信号通路，维持神经干细胞增殖，改善
AD小鼠认知障碍。
［关键词］ 阿尔茨海默病；脑痰清；神经干细胞；细胞增殖
［中图分类号］ R285.5 ［文献标志码］ A ［文章编号］ 1007⁃4368（2025）10⁃1386⁃10
doi：10.7655/NYDXBNSN241326

Role and mechanism of Nao Tan Qing in proliferation of neural stem cells in AD mice

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1，2
1
2*
2，3
2，4
WANG Jingze ，LI Qianqian ，GONG Xuanwei ，YANG Yi ，HOU Lin ，WANG Shukun ，YUAN Zengqiang 1，2*
School of Basic Medicine，Qingdao University，Qingdao 266071；Academy of Military Medical Sciences，Beijing
1 2
100850；School of Basic Medicine，Hebei Medical University，Shijiazhuang 050017；School of Basic Medicine，
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Shanxi University of Chinese Medicine，Jinzhong 030619，China
［Abstract］ Objective：To investigate the effects and molecular mechanisms of Nao Tan Qing（NTQ）on neural stem cell（NSC）
proliferation in Alzheimer’s disease（AD）mice. Methods：Transgenic mice with five familial Alzheimer’s disease（5 × FAD）were
randomly assigned to two groups，the AD group treated with ddH 2O and AD + NTQ group administered with NTQ by gavage.
Immunofluorescence staining，real⁃time quantitative PCR（RT⁃qPCR），and Western blot were used to evaluate NSC proliferation in
hippocampus. In vitro，embryonic NSCs of C57/BL6J mice were isolated and cultured with PBS or NTQ. Cell proliferation was detected
by CCK⁃8 method and cell apoptosis was analyzed by TUNEL. Immunofluorescence staining was used to detect the number of sex⁃
determing region of Y chromosome（SOX2）⁃box transcription factor 2（SOX2）positive，5⁃bromo⁃2⁃deoxy uridine（BrdU）positive，
and doublecortin（DCX）positive cells. The mRNA and protein levels of SOX2 and DCX were measured by RT⁃qPCR and Western blot.
The expressions of cyclin D1，p27/Kip1 and GATA2 were detected by RT⁃qPCR and Western blot. The expression level of SOX2 was

［基金项目］ 国家自然科学基金（82230042）；山东省自然科学基金（ZR2023MH122）
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通信作者（Corresponding author），E⁃mail：zqyuan@bmi.ac.cn（ORCID：0000⁃0001⁃5739⁃2867）：wangsk2020@126.com（ORCID：0009⁃
0000⁃0688⁃1927）