Page 19 - 南京医科大学自然版

第45卷第10期 王景泽，李倩倩，弓玄伟，等. 脑痰清在AD小鼠神经干细胞增殖中的作用和机制［J］.
2025年10月 南京医科大学学报（自然科学版），2025，45（10）：1386-1394，1486 ·1387 ·

detected by RT⁃qPCR and Western blot after the in vitro treatment of NSC using cyclin D1⁃cyclin⁃dependent kinase（CDK）inhibitor.
+
Results：In the AD+NTQ group，the number of SOX2 cells in hippocampus significantly increased，with a marked elevation in SOX2
mRNA and protein levels compared with the AD group. In vitro，the diameter of neurospheres treated with NTQ was significantly larger，
+
+
+
along with the increased number of BrdU ，SOX2 ，and DCX cells. Moreover，SOX2 and DCX mRNA levels，as well as SOX2 protein
level，were notably elevated. Mechanistically，the expression of GATA2 and its downstream molecule p27/Kip1 were decreased in the
hippocampus of AD+NTQ mice，and the inhibitory effect on cyclin D1 was weakened in NSC proliferation. Addition of cyclin D1⁃CDK
inhibitor attenuated the increase in SOX2 and DCX expression triggered by NTQ. Conclusion：NTQ maintains NSC proliferation and
alleviates cognitive deficits in AD mice by modulating the GATA2⁃p27/Kip1⁃cyclin D1 signaling pathway.
［Key words］ Alzheimer’s disease；Nao Tan Qing；neural stem cell；cell proliferation
［J Nanjing Med Univ，2025，45（10）：1386⁃1394,1486］

阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）是老年 低脑内Aβ水平，减缓AD病程 ［11］ 。但这些药物可缓
人群中最常见的神经退行性疾病。据统计，全球 解症状，不能阻止疾病进展，疗效十分有限 ［12］ 。因
AD 患者多达 5 000 万 ，造成了极大的医疗和经济 此，深入开展AD的药物研究至关重要。
［1］
负担。AD 主要的病理表现是脑内大量β⁃淀粉样 近年来，关于中药复方治疗 AD 的研究日益增
（amyloid β，Aβ）蛋白沉积，tau 蛋白过度磷酸化，导 多。据报道，地黄益智方调控核因子红细胞 2 相关
致神经元死亡，海马区神经发生减少，造成认知功 因 子 2（nuclear factor erythroid ⁃ 2 related factor 2，
能及学习记忆障碍 ［2-3］ 。因此，深入开展 AD 病理机 Nrf2）/抗 氧 化 反 应 元 件（antioxidant response ele⁃
制解析和药物研发对AD治疗至关重要。 ment，ARE）信号通路，促进血红素加氧酶⁃1（heme
神经干细胞（neural stem cell，NSC）是一类具有 oxygenase⁃1，HO⁃1）和 NAD（P）H：醌氧化还原酶 1
［4］
自我更新和增殖分化潜能的祖细胞 。NSC分化形 ［NAD（P）H：quinone oxidoreductase 1，NQO1］的表
成的神经元可以有效恢复 AD 导致的神经元丢失， 达，抑制AD小鼠海马区神经元死亡 ［13］ ；酸枣仁汤激
修复受损的突触网络，已被证明在 AD 治疗中具有 活 DJ⁃1/Nrf2 信号通路，减轻神经元丢失及突触损
极大潜力 。研究显示，AD 小鼠脑内 Aβ斑块影响 伤，改善AD小鼠认知功能下降 ［14］ ；补益脾胃元气方
［5］
NSC 细胞活力，导致细胞死亡，数量减少 。AD 患 药激活小鼠海马区 PKA/ERK/p⁃CREB（cAMP⁃re⁃
［6］
者大脑齿状回中，Notch 和骨形态发生蛋白（bone sponse element binding protein）信号通路，改善AD学
morphogenetic protein，BMP）信号通路调控NSC处于 习记忆障碍 ［15］ ；补脑Ⅰ号增加 APP/PS1 模型小鼠脑
静息状态，新生神经元不足，海马区神经发生减少， 内 血 管 内 皮 生 长 因 子（vascular endothelial growth
造成认知功能障碍 。AD 小鼠中移植 NSC 可提高 factor，VEGF）、脑源性神经营养因子（brain⁃derived
［7］
海马内神经营养因子（neurotrophic factor，NTF）的水 neurotrophic factor，BDNF）和碱性成纤维细胞生长
［8］
平，修复受损的神经回路，减缓AD进程 ；还可抑制 因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）水平，促进
Aβ沉积引起的糖原合成酶激酶 3（glycogen synthase NSC 增殖，改善神经突触结构，实现神经再生 ［16］ ；神
kinase 3β，GSK ⁃ 3β）活 性 过 强 ，通 过 调 节 Wnt/β ⁃ 藻健脑口服液上调 AD 小鼠 BDNF，促进 NSC 增殖，
catenin 信号通路，促进 AD 小鼠神经发生 。这提 增加神经元数量，促进内源性神经发生 ［17］ 。这表
［3］
示，AD中NSC增殖受损，而维持NSC增殖可能改善 明，中药复方在AD治疗中具有极大前景。
AD认知功能障碍。 中药复方颗粒脑痰清（Nao Tan Qing，NTQ）是由
目前，常见的AD治疗药物有胆碱酯酶抑制剂、 胆南星、黄芩、黄连、清半夏、天麻、干姜、石菖蒲和
N⁃甲基⁃D⁃天门冬氨酸（N⁃methyl⁃D⁃aspartic acid， 炙甘草8种草药组成，其主要功效为清热解毒，泻火
NMDA）受体拮抗剂和抗淀粉样蛋白药物等。如多 豁痰，益智清神。团队前期研究发现，NTQ通过抑制
［18］
奈哌齐通过抑制乙酰胆碱酯酶，刺激胆碱能神经传 神经炎症，调节糖脂代谢，改善AD认知功能障碍 。
［9］
递，改善认知功能 ；美金刚通过阻断谷氨酸与 但 NTQ 是否影响脑内 NSC 而改善认知功能障碍并
NMDA受体结合，减缓神经损伤，对神经细胞具有保 不明确。
护作用 ［10］ ；Aducanumab 是一种单克隆抗体，有效降 因此，本研究使用五转家族性阿尔茨海默病模型