Page 70 - 南京医科大学自然版
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第45卷第10期
               ·1438 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2025年10月


                                                                LNCap、DU145 和 PC⁃3 的 APOE mRNA 和蛋白质表
              2 结    果
                                                                达水平(P均<0.001)。比较si⁃APOE#1、si⁃APOE#2、
              2.1  敲低 APOE 降低前列腺癌细胞的活性和增殖                       si⁃APOE#3 之间的 qRT⁃PCR 结果,si⁃APOE#3 组的
              能力                                                APOE mRNA表达水平最低,表明si⁃APOE#3组的敲
                  在使用阴性对照 si⁃NC 和 3 种 siRNA 转染的                 降效率显著高于其他两组,故选择 si⁃APOE#3 进行
              LNCap、DU145 和 PC⁃3 前列腺癌细胞系中,通过                    后续实验。通过 CCK⁃8 法和克隆形成实验检测敲
              qRT⁃PCR 和 Western blot 检测转染效率(图 1A、B),            降 APOE 对前列腺癌细胞活性和增殖能力的影响,
              结果显示,与si⁃NC 组相比,si⁃APOE#1、si⁃APOE#2、              发现转染 si⁃APOE 后的 3 种前列腺癌细胞 LNCap、
              si⁃APOE#3 均 可 显 著 降 低 3 种 前 列 腺 癌 细 胞 系           DU145和PC⁃3活性均显著降低(图1C,P均<0.001);


              A                    ***                si⁃NC      B
                                  ***       *** ***   si⁃APOE#1          LNCap       DU145        PC⁃3
                                  ***
                                                      si⁃APOE#2
                         ***
                 Relative APOE mRNA expression  1.0  *** ***  ***  ***  β⁃actin  si⁃NC  si⁃APOE#1  si⁃APOE#2  si⁃APOE#3  si⁃NC  si⁃APOE#1  si⁃APOE#2  si⁃APOE#3  si⁃NC  si⁃APOE#1  si⁃APOE#2  si⁃APOE#3  -36 kDa
                  1.5
                                                      si⁃APOE#3
                                             ***
                        ***
                                                                 APOE
                  0.5
                                                                                                         -42 kDa

                    0
                        LNCap     DU145      PC⁃3
              C
                              LNCap                           DU145                            PC⁃3
                1.5    si⁃NC                     1.5    si⁃NC                    1.5    si⁃NC
                       si⁃APOE                          si⁃APOE                         si⁃APOE
               nm)  1.0                      ***  nm)  1.0                    ***  nm)  1.0                   ***

               (450  D  0.5                     (450  D  0.5                    (450  D  0.5



                 0                                0                                0
                        24    48    72    96             24    48   72    96             24    48    72    96
                            Time(h)                          Time(h)                          Time(h)
              D                   si⁃NC       si⁃APOE


                        LNCap
                                                                     800                       si⁃NC
                                                                                               si⁃APOE
                                                                                  ***   ***
                                                                    Colony fomation numbers  400
                                                                           ***
                                                                     600

                        DU145                                        200



                                                                       0
                                                                          LNCap  DU145  PC⁃3
                         PC⁃3


                 A:The relative expression level of APOE mRNA was determined by qRT⁃PCR. B:The relative expression level of APOE was determined by west⁃
              ern blot assay. C:CCK⁃8 assay was performed to evaluate the viability pf prostate cancer cells. D:The proliferative ability of prostate cancer cells was de⁃
              tected by colony formation assay. All the cell experiments were performed in triplicate for each group and repeated three times.  *** P < 0.001(n=3).
                                         图1 敲低APOE降低前列腺癌细胞的活性和增殖能力
                       Figure 1 Knockdown of APOE reduced the viability and proliferation abilities of prostate cancer cells
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