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第45卷第3期
·328 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2025年3月

that after the Rictor knockout，BMDM exhibited significant polarization of M1 macrophages，while the polarization of M1 macrophages
was significantly reduced in the TFDS+BMDM group；however，there was no significant change in polarization after TFDS intervention
in Rictor knockout of BMDM compared with that before intervention. Conclusion：TFDS may effectively and safely reduce the
formation of renal calcium oxalate stones，possibly by inhibiting the Rictor regulated polarization of M1 macrophages.
［Key words］ macrophage polarization；renal calcium oxalate stones；Rictor；total flavonoids of Desmodium styracifolium
［J Nanjing Med Univ，2025，45（03）：327⁃333］

泌尿系结石是泌尿外科常见病之一，我国泌尿 实验动物中心，选择性巨噬细胞 Rictor 基因敲除小
［1］
系结石的发病率为 1%~5% 。草酸钙结石是泌尿 鼠（Rictor Cre ）及其对照组小鼠（Rictor Cre ）由南
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系结石中最常见的类型，占 70%~80% ［2-3］ 。由于输 京医科大学第二附属医院戴春笋教授馈赠。研究
尿管镜碎石术、体外冲击波碎石术等治疗技术的飞 涉及的所有实验动物均饲养于南京医科大学实验
速发展，草酸钙结石的治疗取得了极大成功，但其 动物基地（峨嵋岭），所有实验动物相关操作均经过
发生率及复发率依然居高不下。有研究表明，肾草酸 南京医科大学实验动物福利伦理委员会审核并批
钙结石的5年复发率约50%，因此如何预防肾草酸钙 准（伦理编号：IACUC⁃2109025）。
［4］
结石的形成是泌尿外科的热点问题之一 。炎症反 肾草酸钙结石+敲除组（Rictor Cre ）及肾草酸钙
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应在肾草酸钙晶体形成中发挥了重要作用。草酸钙 结石+对照组（Rictor Cre ）采用 1%乙二醇（ethylene
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晶体可刺激肾小管上皮细胞单核细胞趋化蛋白 glycol，EG）的饮用水，自由饮水 28 d，并给予 2%氯
（monocyte chemoattractant protein⁃1，MCP⁃1）表达增 化铵 2 mL/d 灌胃 14 d，10%葡萄糖酸钙 1.5 mL 腹腔
加，趋化单核/巨噬细胞进入肾脏组织；而巨噬细胞极 注射 14 d，构建小鼠肾草酸钙结石模型。在结石
化又可通过促进肾脏组织炎症、吞噬作用、促进氧化 模型小鼠建模第 1 天，采用 TFDS 分别灌胃处理
［5］
应激损伤等机制，进一步促进晶体的黏附和聚集 。 Rictor Cre +EG 组小鼠或 Rictor Cre +EG 组小鼠，
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由此可见，调控巨噬细胞极化成为抑制肾草酸钙晶体 400 mg/（kg·d），连续干预 28 d，构建小鼠肾草酸钙
形成以及草酸钙晶体性肾损伤的重要线索。 结石治疗模型。28 d 后分别收集上述 4 组小鼠的
广金钱草属于豆科山蚂蝗属植物，众多研究表 肾脏组织、外周血清等标本。
明，广金钱草有利水通淋、排石的功效，被广泛应用 1.1.2 试剂
于泌尿系结石、泌尿系感染、胆结石等 。广金钱草 TFDS（武汉人福生物医药有限公司）；EG溶液、
［6］
总黄酮（total flavonoids of Desmodium styracifolium， 氯化铵溶液（天津广成化学试剂有限公司）；葡
TFDS）是从广金钱草中提取的有效成分，已被证实 萄糖酸钙溶液（四川维克奇生物科技有限公司）；
可有效促进输尿管结石排出，并具有较高的安全 F4/80、CD206、诱导型一氧化氮含酶（inducible nitric
性 。然而，TFDS对泌尿系结石形成的作用并未得 oxide synthase，iNOS）抗体（Abcam 公司，美国）；PCR
［7］
到证实。团队在既往研究中已证实，mTOR复合物2 试剂盒（上海翌圣生物科技股份有限公司）。
的 RPTOR 独立伴侣（RPTOR independent companion 1.2 方法
of mTOR complex 2，Rictor）蛋白在巨噬细胞极化中 1.2.1 细胞培养与干预
［8］
发挥重要调控作用 。本研究拟通过巨噬细胞选择 原代小鼠骨髓来源的巨噬细胞（bone marrow⁃
性 Rictor 敲除小鼠，构建肾结石模型及体外细胞模 derived macrophages，BMDM）提取自 Rictor Cre 小
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型等，探讨TFDS对巨噬细胞极化、肾草酸钙结石形 鼠（Rictor ）及其对照 Rictor Cre 小鼠（Rictor ），
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成的作用及可能机制。 在 37 ℃、5% CO2的环境中培养。将上述细胞随机
分成 Rictor +M1、Rictor +M1+TFDS、Rictor +M1、
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1 材料和方法
Rictor +M1+TFDS 等 4 组。使用 100 ng/mL 脂多糖
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1.1 材料 和 40 ng/mL 干扰素⁃γ加入 BMDM 中培养 24 h，促
1.1.1 动物 使巨噬细胞向 M1 型极化；在此基础上，Rictor +
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野生型 C57BL/6J 小鼠购于南京医科大学医药 M1+TFDS 组、Rictor +M1+TFDS 组均接受 TFDS 干
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