Page 34 - 南京医科大学自然版

第45卷第6期
·772 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2025年6月

A
M0 M0+BA M1 M1+BA 4 *** 2.0 * * 8 * *
The ratio of P62/GAPDH
P62 62 kDa 3 * 1.5 6

Beclin⁃1 52 kDa 2 The ratio of Beclin⁃1/GAPDH 1.0 The ratio of LC3⁃Ⅱ/GAPDH 4

LC3B⁃Ⅰ 16 kDa 1 0.5 2
LC3B⁃Ⅱ 14 kDa 0 0 0
M0 M1 M0 M1 M0 M1
GAPDH 37 kDa M0+BA M1+BA M0+BA M1+BA M0+BA M1+BA

B M1+3⁃MA+BA ** * ***
The ratio of P62/GAPDH The ratio of Beclin⁃1/GAPDH 1.0 Relative mRNA expression of IL⁃1β
M0 M1 M1+BA 5 *** 2.5 * 5 *** ***
P62 62 kDa 4 3 *** 1.5 4 3

Beclin⁃1 52 kDa 2 1 0.5 2 1
LC3B⁃Ⅰ 16 kDa 0 0 0
M1+3⁃MA+BA M1+3⁃MA+BA M1+3⁃MA+BA
LC3B⁃Ⅱ 14 kDa M0 M1 M1+BA M0 M1 M1+BA M0 M1 M1+BA
GAPDH 37 kDa

C 2.5 ** * *** 2.5 * * * 8 6 *** ** ***
2.0
1.5
M0 M1 M1+BA M1+3⁃MA+BA The ratio of LC3⁃Ⅱ/GAPDH 1.5 The ratio of IL⁃1β/GAPDH 1.0 Relative mRNA expression of 4 IL⁃8
1.0
IL⁃1β 30 kDa 0.5 0.5 2

GAPDH 37 kDa 0 M0 M1 M1+BA 0 M0 M1 M1+BA 0 M0 M1 M1+BA
M1+3⁃MA+BA M1+3⁃MA+BA M1+3⁃MA+BA

A：Western blot analysis was performed to examine the expression levels of P62，Beclin⁃1，and LC3B. B：Following the addition of 3⁃MA，Western
blot analysis was conducted to assess the expression levels of P62，Beclin⁃1，LC3B，and IL⁃1β. C：RT⁃PCR was employed to quantify the mRNA expres⁃
**
***
*
sion levels of IL⁃1β and IL⁃8 in each group. P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001，n=3.
图4 BA的抗炎作用与自噬激活作用有关
Figure 4 The anti⁃inflammatory effect of BA is related to the activation of autophagy
提高hDPSC的修复再生潜能，或将成为逆转炎症进 处理可以降低M1巨噬细胞iNOS的表达，表明BA能
［18］ ［23］
程的重要治疗策略 。本课题组的前期研究显示BA 抑制巨噬细胞的 M1 型极化，与 Xu 等 的结论相
有效促进LPS诱导的炎症hDPSC成牙/骨分化，提示 同。本研究注意到 BA 具有自噬调节的作用，这与
BA 可能有效修复早期不可逆牙髓炎的牙髓 ［16］ 。对 Wang 等 ［24］ 的研究结论相似。LC3B⁃Ⅱ、Beclin⁃1 上
于牙髓炎的治疗往往包含两个方面，一是炎症的控 调和 P62 蛋白下调等自噬标志物的表达变化证实，
制，二是组织功能的恢复。巨噬细胞作为免疫系统 BA 可显著增强自噬活性。当使用 3⁃MA 阻断自噬
的第一道防线，能提呈抗原并释放大量炎症因子， 后，BA 的抗炎效应被显著抑制，提示其治疗作用可
在免疫反应的启动和调节中发挥重要作用 ［5，19-20］ 。 能通过激活自噬而实现。除此之外，提取 BA 处理
本研究从控制炎症、改善功能的角度出发，探 后的M1巨噬细胞上清液并加入hDPSC，ALP染色与
讨BA在炎症状态下对巨噬细胞生物学行为的调控 ARS 染色显示，与 CM⁃M1 组相比，经 BA 处理的 M1
作用及机制。BA处理THP⁃1来源的M1型巨噬细胞 巨噬细胞上清液可以明显增强 hDPSC 矿化能力。
后，利用 RT⁃qPCR、Western blot、免疫荧光等技术发 RT⁃qPCR、Western blot 检测发现，CM⁃M1+BA 组成
现 BA 可以降低 M1 型巨噬细胞 IL⁃1β和 IL⁃8 的表 牙/骨相关基因 ALP、RUNX2、DSPP、OPN 和 COL⁃1
达，这与之前的研究结果保持一致 ［21-22］ 。此外，BA 表达上调，证明BA可以通过影响M1型巨噬细胞的