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第45卷第8期
               ·1066 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2025年8月


              间质炎症细胞浸润和肾纤维化；微血管病变，包括                            算受试者工作特征（receiver operating characteristic，
              小动脉内膜玻璃样变性和肾小球纤维蛋白帽等。                             ROC）曲 线 的 曲 线 下 面 积（area under the curve，
              DKD的病理分型如下：Ⅰ型，肾小球基底膜增厚；Ⅱ                          AUC），以评估 CKAP4 表达是否能有效区分肾脏预
              型，超过20%的肾小球发生系膜增生（其中Ⅱa型为                          后不良的患者。同时，采用 ROC 曲线分析确定
              轻度系膜增生，Ⅱb型为重度系膜增生）；Ⅲ型，结节                          CKAP4评分预测肾脏事件的最佳临界值（最高约登
              性硬化（至少见1个K⁃W结节）；Ⅳ型，超过50%肾小                        指数）。此外，Cox比例风险回归模型对肾活检后存
              球发生球性肾小球硬化。病理分级参考2010年肾脏                          活超过6个月患者（n=143）的CKAP4与 DKD 进展的
              病理学会肾间质小管及血管病变的病理分级标准，进                           风险比进行随访。将单变量分析中有统计学意义
                                             ［18］
              行DKD肾间质小管及血管病变评分 。肾小管间质                          （P < 0.05）的临床病理因素作为协变量纳入多变量
              病变（interstitial fibrosisand tubular atrophy，IFTA）评  Cox比例风险模型分析。采用Kaplan⁃Meier分析评价
              分：无（0 分），无肾小管萎缩或间质纤维化；轻度                          CKAP4高表达组和CKAP4低表达组肾活检后6个月
             （1 分），<25% IFTA；中度（2分），25%~50% IFTA；重              以上生存的差异。采用“rms”软件包（R Foundation
              度（3 分），>50% IFTA。间质炎症评分：0分，无间质                    for Statistical Computing）建立列线图（nomogram），基
              炎症；1分，与IFTA相关的炎性浸润；2分，无IFTA区                      于Cox比例风险回归模型预测1年和3年无事件生存
              域也有炎性浸润。血管玻璃样变评分：0分，无；1分，                         的概率。此外，还进行时间依赖性 AUC 分析，以表
              有 1 个小动脉伴玻璃样变性；2 分，有 2 个以上小动                      征肾活检后 6 个月以上 CKAP4 的预测准确性。P <
              脉伴玻璃样变性。血管硬化评分：0 分，无内膜增                           0.05为差异有统计学意义。
              厚；1 分，内膜增厚未超过中膜厚度；2 分，内膜厚度
                                                                2  结 果
              超过中膜厚度。两名病理学医师之间的任何评分
              差异都被反复审查，直到获得共识。                                  2.1  基线资料
              1.2.2 随访                                               本研究共纳入143例经肾穿刺活检证实的DKD
                  将复合肾脏终点定义为Scr比基线值加倍升高                         患者，其中男104例（72.72%），女39例（27.28%），中
              或发生ESKD，作为主要结局。ESKD的定义为发生                         位年龄 54 岁，BMI 为（25.01±3.75）kg/m 。基线时，
                                                                                                    2
              eGFR<15 mL/（min·1.73 m ）或肾移植或维持透析。                24 h尿蛋白为2 512（645.50，5 923.50）mg/d，eGFR为
                                     2
              当患者未达到终点时，记录其最后1次随访数据。生                           66.00（38.50，106.00）mL/（min·1.73 m ）。中位随访
                                                                                                  2
              存时间是从入组到事件发生或最后1次随访的时间。                           期为 2.22 年，随访期间，63 例（44.06%）患者达复合
              1.2.3 免疫组织化学                                      肾脏终点。患者Scr、尿酸、HbA1c、白蛋白等基线水
                  石蜡包埋组织切片2 μm，脱蜡后切片置于柠檬                        平见表1。
              酸盐缓冲液（pH 6.0）中 20 min，并用 PBS 洗涤。在                 2.2  不同病理分期DKD 患者的临床及实验室参数
              室温下用 5%牛血清白蛋白封闭 1 h，切片与 CKAP4                     比较
              抗体（货号：16686⁃1⁃AP，1∶200，Proteintech 公司，美                将 143 例患者依据病理诊断结果分为Ⅱ期、Ⅲ
              国）4 ℃孵育过夜。切片用PBS洗涤，然后与二抗在                         期、Ⅳ期。其中Ⅱ期53例，Ⅲ期52例，Ⅳ期38例（表
              37 ℃孵育 1 h。切片用 DAB 染色 2 min，再用苏木                  2）。3组间Scr、BUN、eGFR、血红蛋白、24 h尿蛋白、
              精复染细胞核，最后脱水并固定。每张切片由显                             白蛋白、TC、LDL⁃C、HDL⁃C、CKAP4表达水平差异均
              微镜随机拍摄8~10张照片，并用Image⁃ProPlus 计算                  有统计学意义（P < 0.05）。病理分型越严重的患者
              阳性表达量。                                            Scr、BUN、TG、24 h 尿 蛋 白 越 高 ，eGFR 越 低（P <

              1.3  统计学方法                                        0.05）。病理特征（IFTA、间质炎症、血管玻璃样变和
                  所有数据统计均在 SPSS26.0 和 Rv4.0.2 中完                血管硬化）在3组间差异也有统计学意义（表2）。
              成。符合正态分布的计量资料以均数±标准差（x ±                          2.3  DKD患者CKAP4表达水平与临床病理特征的
              s）表示，不符合正态分布的用中位数（四分位数）                           相关性
             ［M（P25，P75）］，计数资料用例（百分比）［n（%）］表                         如表 3 所示，CKAP4 的组织学表达与 Scr（r=

              示。采用单因素方差分析（ANOVA）、Kruskal⁃Wallis                 0.235，P=0.005）、BUN（r=0.274，P=0.001）、24 h尿蛋白
              检验或卡方检验进行组间比较。采用 Spearman 相                      （r=0.259，P=0.002）呈正相关，与血红蛋白（r=-0.269，
              关分析 CKAP4 表达水平与临床指标的相关性。计                         P=0.001）、eGFR（r=-0.442，P < 0.001）呈负相关。值
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