Page 20 - 南京医科大学自然版
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第45卷第8期
               ·1076 ·                           南 京    医 科 大 学 学         报                        2025年8月


                      Day0               Day1                Day2               Day3               Day4







                                                         H2d
                 Microscopic views of tail skin grafted onto the back of BALB/c →C57BL/6 H2b  mice on the day of surgery，1 d，2 d，3 d，and 4 d after surgery from
              left to right.
                                                    图1  小鼠皮肤移植镜下观
                                           Figure 1 Microscopic views of skin grafts in mice

              明皮肤移植构建成功。                                        吻合口瘘、移植肾动脉血栓形成等。结合病理染色结
                  各组移植肾组织常规病理染色如图 2A 所示：                        果，本研究后续论证的实验组选择病理损伤典型且切
              cABMR 组 1 可见管周毛细血管出血、扩张，肾小球                       除原位肾脏后生存情况较好的cABMR组1进行。
              内可见单个核细胞浸润，肾小管内出现典型的急性                                 对 SYN14D 组、TCMR14D 组、cABMR 组 1 移植
              小管损伤、小管扩张以及刷状缘脱落，提示管周毛                            肾组织行 CD3 免疫组织化学染色（图 3）。SYN14D

              细血管炎、肾小球炎以及肾小管炎的出现；cABMR                          组、cABMR 组1肾间质和管周毛细血管未见到明显
              组 2 部分肾小管组织结构开始出现崩解坏死，部分                          的CD3 T细胞浸润，TCMR14D组肾间质与管周毛细
                                                                      +
              肾脏边缘皮质区开始出现缺血、坏死，部分肾小管                            血管均有明显的 CD3 T 细胞浸润［（4.22±0.58）% vs.
                                                                                   +
              区域发生坏死；cABMR 组3镜下可见动脉呈洋葱皮                        （0.93±0.36）%，F=124.8，P < 0.001］。
              样改变，肾小管腔狭窄、闭塞，肾小管内细胞核碎裂，                          2.2  同种异体小鼠肾移植cABMR模型的鉴定
              呈凝固型坏死表现。SYN14D组作为对照组，仅表现                              cABMR 组 1 小 鼠 外 周 血 血 清 Cr 水 平 高 于
              为轻度的缺血再灌注损伤和间质水肿；TCMR14D组                         SYN14D 组［（568.90 ± 89.58）μmol/L vs.（283.40 ±
              肾小球急性损伤，肾小管刷状缘脱落明显，肾间质                            42.33）μmol/L，F=62.53，P < 0.01，图 4A］，cABMR 组
              存 在 大 量 单 个 核 细 胞 浸 润 ，符 合 TCMR 表 现 ；             1 小鼠外周血血清BUN水平高于SYN14D组［（5.49±
              aABMR组根据本组之前的成果，已被证实呈典型的                          0.85）mmol/L vs.（2.48 ± 0.31）mmol/L，F=70.52，P <
              ABMR表现    ［10］ 。采用Banff评分对各组进行评价，标                0.01，图 4B］。对移植肾组织行 C3d 免疫荧光染色，
              准及细则如下：间质炎症（i0：<10%；i1：10%~25%；                   结 果 显 示 cABMR 组 1 的 C3d 阳 性 区 域 表 达 较
              i2：26%~50%；i3：>50%），肾小管炎症（t0：无炎症细                 SYN14D 组 明 显 增 多［（5.14 ± 0.87）% vs.（0.74 ±
              胞；t1：1~4个炎症细胞/小管；t2：5~10个炎症细胞/小                   0.52）%，P < 0.001，图 4C、E］。对外周血 IgG 类 DSA
              管；t3：>10 个炎症细胞/小管），肾动脉炎症（v0：无；                    水平行流式细胞术检测，结果显示 cABMR 组 1 的
              v1：<25%管腔面积损失；v2：≥25%管腔面积损失；                      DSA 平均荧光强度较 SYN14D 明显升高［（39 095±
              v3：透壁或/和纤维蛋白样改变和内侧平滑肌坏死），                         2 947）vs.（2 358±388），P < 0.001，图4D］。
              肾小球炎症（g0：无；g1：<25%；g2：25%~75%；g3：>                2.3  cABMR模型与aABMR模型比较结果
              75%），管周毛细血管炎症（ptc0：<3 个炎症细胞；                           选用cABMR模型（cABMR组1）与aABMR模型
              ptc1：≥10%的ptc有≥1个炎症细胞，最多3~4个/ptc；                （BST5D+KT5D 组），分别从移植肾病理染色、Banff
              ptc2：≥10%的ptc有≥1个炎症细胞，最多5~10个/ptc；                评分、血清Cr、BUN、移植肾C3d免疫组织荧光染色、
              ptc3：≥10%的ptc有≥1个炎症细胞，>10个/ptc）。各                 小鼠外周血 IgG 类 DSA 水平、免疫浸润等方面进行
              组的Banff评分如图2B所示。                                  比较。结果表明：cABMR模型管周毛细血管出血扩
                  此外，还观察了各组小鼠的生存时间并行生存                          张、刷状缘脱落情况较 aABMR 模型更为严重，更多
              曲 线 分 析（ 图 2C）。 SYN14D 组 、TCMR14D 组 、             的肾小球内表现出单个核细胞浸润，Banff 评分较

              cABMR组1、cABMR组2、cABMR组3小鼠术后14 d                   aABMR 更高（图 5A、B）。cABMR 小鼠血清 Cr 水平
              生存率分别为 90%、80%、80%、40%、30%，aABMR                  高 于 aABMR［（508.90 ± 77.62）μmol/L vs.（393.70 ±
              组小鼠术后 5 d 生存率为 80%。各组均记录 10 只                     72.11）μmol/L，P < 0.01，图 5C］；cABMR 小鼠 BUN
              C57BL/6 受体小鼠的生存情况。小鼠死亡原因包                         水 平 高 于 aABMR［（5.99±0.59）mmol/L vs.（5.53±
                      H2b
              括：皮肤移植预致敏失败、移植肾失功、输尿管膀胱                           0.18）mmol/L，P < 0.05，图 5D］。cABMR 模型移植肾
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