Page 18 - 南京医科大学自然版

第45卷第8期
·1074 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2025年8月

the C3d⁃positive exoression regions were significantly increased in the cABMR group and the average fluorescence intensity of IgG
DSA in peripheral blood was notably enhanced. Serum Cr and BUN levels in peripheral blood were significantly higher. Compared to
aABMR，the cABMR model of transplanted kidneys showed more extensive peritubular capillary haemorrhage and dilatation，single
nucleus infiltration in the glomeruli，and more typical tubular damage and brush border detachment in the tubules，higher Banff scores，
significantly more positive areas of C3d expression，significantly higher mean fluorescence intensity of peripheral blood IgG DSA，
significantly higher peripheral blood serum Cr and BUN levels. Incontrast to aABMR，cABMR group showed no siginificant infiltration
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of CD19 B cells or CD3 T cells in the renal interstitial or peritubular capillaries，but there was a more significant infiltration of renal
interstitial F4/80 labelled macrophage and Ly6G labelled myeloid cell. Foxp3 and IL⁃10 expression were significantly reduced in the
cABMR model，while the infiltration of IL⁃1β，IL⁃6，TNF⁃α and CCL2 inflammatory cytokines was significantly increased in cABMR
model. Conclusion：A cABMR model with an extended survival period was successfully constructed and identified. This model can be
used to assess the mechanisms and intervention strategies of cABMR，with high clinical application value.
［Key words］ renal transplantation；chronic antibody⁃mediated rejection；mouse model；banff classification
［J Nanjing Med Univ，2025，45（08）：1073⁃1081］

抗体介导排斥反应（antibody⁃mediated rejec⁃ 动物使用许可证：SCXK（苏）2023⁃0029］。所有实验
tion，ABMR）是影响远期移植肾存活的重要因素 ［1-2］ ， 动物相关操作均经过南京医科大学实验动物福利伦
近年来，越来越多的研究发现ABMR 与移植物功能 理委员会审核并批准（伦理编号：IACUC⁃2411073）。
丧失密切相关，但目前对于ABMR 的作用及机制仍 本实验遵循3R原则进行。
不清楚 ［3-4］ ，因此构建动物模型对研究 ABMR 的发 实验动物均为雄性，周龄6~8周，体重20~30 g。
生机制、临床防治以及改善移植肾预后具有重要 基于各组受体小鼠的预期生存率及相对于对照组
［5］
意义 。慢性 ABMR（chronic ABMR，cABMR）是晚 的风险比（hazard ratio，HR），设定统计功效（1-β）为
期肾同种异体移植物丢失的重要原因 ［6-7］ ，较急性 80%，显著性水平（α）为 0.05（双侧），确定总受体小
ABMR（acute ABMR，aABMR）在临床中更常见 ，其 鼠样本量为62例，各组样本量约为10例，根据受体
［8］
主要导致移植肾小管周围毛细血管基底膜增厚、分 小鼠样本量确定供体小鼠样本量。分组如下：①同
层及管腔狭窄、肾小球基底膜破坏、微血栓形成及 基因对照组（SYN14D 组）：20 只 C57BL/6 ，未行预
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［9］
小血管向大血管蔓延等 ，对移植肾功能会造成明显 致敏，只行C57BL/6 →C57BL/6 肾移植术，14 d后
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的不可逆损害，目前临床尚无特异性治疗手段 。随 取移植肾；②T 细胞介导排斥反应（T cell⁃mediated
［10］
着皮肤预致敏方法的开发和移植肾吻合血管方法 rejection，TCMR）组（TCMR14D组）：10只BALB/c ，
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的改进，本中心在国内首次报道同种异体小鼠肾移 10只C57BL/6 ，未行预致敏，行BALB/c →C57BL/6 H2b
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植 ABMR 模型的成功构建及鉴定 ［11］ ，但构建的 肾 移 植 术 ，14 d 后 切 取 移 植 肾 ；③ aABMR 组
ABMR 模型移植受体小鼠的生存周期较短 ［12-13］ ，不 （BST5D+KT5D）：10 只 BALB/c ，10 只 C57BL/6 ，
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利于探索长期干预治疗措施对 cABMR 移植肾预后 将供体BALB/c 背部皮肤移植到受体C57BL/6 背
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的效果 ［14］ 。为此，本研究拟通过改进皮肤移植后肾 部，5 d 后行 BALB/c →C57BL/6 肾移植，5 d 后取
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脏移植的时间节点和切取移植肾脏的时间节点，利 移 植 肾 ；④ cABMR 组 1（TST2D + KT14D）：10 只
用 BALB/c 和 C57BL/6 的小鼠品系组合，构建并 BALB/c ，10只C57BL/6 ，将供体BALB/c 尾部皮
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鉴定一种同种异体小鼠肾移植cABMR模型。 肤移植到受体C57BL/6 背部，2 d后行BALB/c →
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C57BL/6 肾移植，14 d后切取移植肾；⑤cABMR组
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1 材料和方法
2（TST3D+KT14D）：10只BALB/c ，10只C57BL/6 ，
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1.1 材料 将供体BALB/c 尾部皮肤移植到受体C57BL/6 背
本研究使用的C57BL/6 与BALB/c 小鼠均购 部，3 d后行BALB/c →C57BL/6 肾移植，14 d后切
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于南京医科大学医药实验动物中心［实验动物生产 取移植肾；⑥cABMR 组 3（TST4D+KT14D）：10 只
许可证：SCXK（苏）2021⁃0001］。研究涉及的所有实 BALB/c ，10只C57BL/6 ，将供体BALB/c 尾部皮
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验动物均饲养于南京医科大学实验动物基地［实验 肤移植到受体 C57BL/6 背部，4 d后行BALB/c →
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