Page 105 - 《南京医科大学学报（自然科学版）》2025年第9期

第45卷第9期 沈丽华，张倩倩，金晓燕，等. 从组织特征筛选qPCR阳性标本：快捷、准确、经济诊断肺结核
2025年9月 ［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2025，45（9）：1316-1325 ·1317 ·

In FFPE specimens of pulmonary tuberculosis，the area under the curve，sensitivity，and specificity of the necrotic area percentage for
qPCR positive results were 0.794，78.2% and 78.9%，while for the maximum diameter of granulomas were 0.600，88.5%，and 43.7%，

respectively. Conclusion：When CT findings of peripheral nodules show hilar and mediastinal lymphadenopathy，lobulation sign，and
spiculation sign，they are more likely to delay diagnosis of granulomatous diseases such as pulmonary tuberculosis. The measurement of
necrotic area and the maximum diameter of granulomas can improve the sensitivity of qPCR detection. Preliminary screening with HE
staining to select high⁃quality specimens for testing can enhance the accuracy of tuberculosis diagnosis.
［Key words］ pulmonary tuberculosis；quantitative PCR；histopathological features；auxiliary diagnosis
［J Nanjing Med Univ，2025，45（09）：1316⁃1325］

结 核 病（tuberculosis，TB）是 结 核 分 枝 杆 菌 期短、能够区分混合感染、不需要生物安全 3 级设
（Mycobacterium tuberculosis，MTB）引起的一种空气 施、相对容易自动化操作等优点 ［14-16］ 。但在实际操
传播疾病，通常会影响肺部，导致严重的咳嗽、发烧 作过程中，研究人员也发现并不适合所有类型的
［1］
和胸痛 。尽管在疫苗接种、治疗和诊断方面取得 标本 ［17-18］ ，选择不恰当的蜡块检测将导致最终结果
［2］
了进展，但 TB 仍然是全球健康面临的巨大挑战 。 不可靠，造成诊断延迟，且由于其成本相对较高，增
早期诊断对于有效切断疾病传播和提高治疗效果 加了TB患者的经济负担。
至关重要 ［3-5］ 。 HE 染色是组织病理学中最常用的方法，具有
包括 TB 在内的肺肉芽肿类疾病的早期筛查主 典型结核特征的标本可以通过常规HE染色进行可
要依赖于胸部影像学检查，但部分病变并不典型， 靠的TB推定诊断，观察组织切片，可以识别出TB的
表现出多样性，与恶性肿瘤难以鉴别。因此，支气 一些特征性病理改变，包括肉芽肿形成、干酪样坏
管内超声引导下经支气管针吸活检（endobronchial 死、朗汉斯巨细胞、纤维化等 ［19］ 。由于HE染色主要
ultrasound ⁃ guided transbronchial needle aspiration， 用于显示组织结构和炎症反应，而不是直接检测
EBUS⁃TBNA）、经皮肺穿刺活检（percutaneous nee⁃ MTB，在TB初始筛查中具有很高的敏感性 ［20］ 。且操
dle lung biopsy，PNLB）或手术切除肺肉芽肿类标本在 作简单、成本低廉，适用于大规模筛查和初步诊断，
肺结核的诊断中具有重要意义。这些标本提供了详 在资源有限的环境中尤为实用，能够快速提供初步
细的组织学信息，有助于识别结核特征性病变 。 诊断信息，从而决定是否需要进一步检测。
［6］
对石蜡包埋（formalin⁃fixed paraffin⁃embedded， 基于上述背景，本研究选择189例因CT征象不
FFPE）标本进行抗酸染色是 TB 病理诊断的传统金 典型、未取得呼吸道分泌物标本或分泌物标本MTB
标准之一 ［7-8］ 。该方法通过在显微镜下观察石蜡切 检测结果为阴性而行 EBUS⁃TBNA、PNLB 或外科手
片中抗酸杆菌的存在来确诊结核感染。它对样本 术的肉芽肿疾病患者，采用 HE 染色对其进行初始
质量要求较高，如果样本中细菌数量较少或细菌分 筛查，筛选出149例具有TB典型特征的标本行Ziehl⁃
布不均，可能会导致结果不可靠 。显微镜下观察 Neelsen（Z⁃N）抗酸染色和qPCR检测；同时，通过HE
［9］
染色阳性标本，很难区分 MTB 和非结核分枝杆菌 染色观察TB标本的特征性病理改变，分析这些病理
（nontuberculous mycobacteria，NTM），因为这两种分 特征与 qPCR 结果之间的相关性。旨在通过 HE 染
枝杆菌都耐酸且形态相似 ［10］ 。因此，抗酸染色在肺 色筛选出具有典型 qPCR 阳性特征的标本，直接进
组织 FFPE 标本上的检测灵敏度和特异度非常低， 行 qPCR 检测，从而简化诊断步骤，降低成本，提高
其结果的判定也取决于技术人员的主观判断 ［11-12］ 。 诊断的准确性和效率，并提出一种快捷、准确、经济
因此，在典型的 TB 诊断流程中，虽然抗酸染色通常 的TB诊断流程。
作为初筛手段，但需要后续的分子检测技术复核以
1 对象和方法
明确最终的诊断结果。
随着分子检测技术的发展，实时荧光定量 PCR 1.1 对象
（real⁃time fluorescent quantitative PCR，qPCR）被引 对南京医科大学附属脑科医院（南京市胸科医
入TB检测中 ［13］ 。针对仅存在于MTB中的插入元件 院）2020年1月—2022年12月189例经EBUS⁃TBNA、
IS6110 靶基因的 qPCR 检测具有特异性高、检测周 PNLB 或外科手术的肉芽肿疾病患者的临床和影像