Page 53 - 《南京医科大学学报》自然科学版2026年第2期

第46卷第2期 汤莉巧，段程伟，陈伟观，等. 下调Dixdc1表达抑制创伤性脑损伤后星形胶质细胞极化［J］.
2026年2月 南京医科大学学报（自然科学版），2026，46（2）：202-212 ·209 ·

采用流式细胞术分析细胞周期，LPS 组中 S 期星形 Western blot 检测 Dixdc1 敲低后星形胶质细胞
胶质细胞的比例显著增加，Dixdc1⁃sh 组中 S 期的细 A1、A2表型相关标志物的表达水平。与PBS处理组
胞比例减小，细胞分裂被抑制（图5A、B）。根据细胞 相比，LPS处理组GFAP、C3的蛋白表达水平明显增
周期的检测结果，Western blot 检测 S 期相关蛋白 加，而 S100A10 蛋白表达水平降低，Dixdc1⁃sh 组中
CDK2、Cyclin A 的表达，LPS 组中 CDK2、Cyclin A 蛋 C3 表 达 量 降 低 ，而 S100A10 表 达 量 增 加（ 图
白表达增加，Dixdc1⁃sh 组中其蛋白水平降低（图 6D~G）。结果表明，Dixdc1 敲低抑制 A1 表型极化，
5C~E）。提示Dixdc1敲低抑制星形胶质细胞的细胞 促进星形胶质细胞向A2表型的转化。在RNA水平
周期，减少星形胶质细胞增殖。 上，热图显示 Dixdc1⁃sh 明显抑制了包括 Serping1、

2.6 敲低Dixdc1抑制LPS诱导的A1型星形胶质细 H2.D1、Gbp2 在内的多种基因表达。与之相反，
胞极化 Dixdc1⁃sh 组显著上调包括 S100A10、Clcf1、Emp1 在
采用 Western blot 检测小鼠脑损伤后星形胶质 内的 A2 相关基因的表达（图 6H）。同样，用细胞免
细胞 A1、A2 表型极化的标志物 C3 及 S100A10 的表 疫荧光染色验证 Dixdc1 敲低对星形胶质细胞表型
达情况。C3蛋白在损伤前期表达水平增加，后期减 极化的影响，Dixdc1 敲低后 C3 的荧光强度增加而
少，而S100A10蛋白在损伤前期表达水平减少，后期 S100A10的强度降低（图6I）。
增加（图6A~C）。同时Dixdc1的表达水平也是在损 研究表明，脑损伤后STAT3已被确定为星形胶
伤初期有所增加，后期减少，这与神经毒性星形胶 质细胞反应的关键调控因子 。因此，通过Western
［19］
质细胞的表达存在一致性，因此合理推测Dixdc1对 blot 检测发现 Dixdc1⁃sh 组中 STAT3 磷酸化水平下
星形胶质细胞表型极化具有重要作用。 降（图6J、K）。提示Dixdc1敲低可能通过抑制STAT3

A NC Dixdc1⁃sh B 100 G2
RMSD：1.83 300 RMSD：1.54 （%） S
300 %GI：49.5 %GI：44.8
%S：2.95 %S：2.23 80 G1
%G2：49.1 200 %G2：54.8
Count G1 Mean：47104 Count G1 Mean：41957 60
200
G2 Mean：62204
G2 Mean：74960
G2 CV：33.3
100 G1 CV：15.2 100 G1 CV：17.1 Percent of cell cycle 40
G2 CV：26.5
% less G1：-1.43 % less G1：-1.95
% greater G2：-0.85 % greater G2：-1.02 20
0 0
0 50K 100K 150K 200K 250K 0 50K 100K 150K 200K 250K
0
PE⁃A PE⁃A
NC LPS
LPS Dixdc1⁃sh+LPS Dixdc1⁃sh Dixdc1⁃sh+LPS
300 RMSD：2.04 RMSD：2.53
%GI：47.7 300 %GI：51.7
%S：38.3 %S：34.6
%G2：14.7
%G2：14.1
Count 200 G1 Mean：43265 Count 200 G1 Mean：40528
G2 Mean：75900
G2 Mean：83199
100 G1 CV：15.4 100 G1 CV：16.7
G2 CV：11.8
G2 CV：11.3
% less G1：-2.15 % less G1：-2.63
% greater G2：-2.42 % greater G2：-1.49
0 0
0 50K 100K 150K 200K 250K 0 50K 100K 150K 200K 250K
PE⁃A PE⁃A
C D E *** ***
PBS LPS 1.5 PBS 1.5 PBS
** ***
NC Dixdc1⁃sh NC Dixdc1⁃sh LPS 1.0 LPS
CDK2/α⁃Tubulin CyclinA/α⁃Tubulin 0.15
CDK2 33 kDa 1.0 *** 0.20
Cyclin A 47 kDa 0.5 0.10
α⁃Tubulin 55 kDa 0.05
0 0
NC
NC
Dixdc1⁃sh
Dixdc1⁃sh Dixdc1⁃sh Dixdc1⁃sh NC
NC
A，B：Cell cycle analysis of astrocytes by flow cytometry. C-E：Western blot detection（C）of CDK2（D）and Cyclin A（E）in astrocytes after LPS（1 μg/mL，
**
24 h）treatment. P < 0.01 and *** P < 0.001（n=3）.
图5 敲低Dixdc1抑制LPS诱导的星形胶质细胞的细胞周期
Figure 5 Knockdown of Dixdc1 inhibits LPS⁃induced cell cycle in astrocytes