Page 84 - 南京医科大学自然版
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第46卷第6期
·866 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2026年6月
宫 容 积（uterine volume，UV）、卵 巢 容 积（ovarian 体重、黄体生成素（luteinizing hormone，LH）基础值、
volume，OV）、卵泡数目（number of follicles，NOF）、子 卵泡刺激素（follicle⁃stimulating hormone，FSH）基础
宫长度（uterine length，UL）由专业的超声医师评估。 值及空腹血糖（fasting plasma glucose，FPG）方面的
受试女童禁食12 h后，于上午8：00在安静状态 差异均具有统计学意义（P均< 0.05）。年龄、总胆红
下采集静脉血。刺激试验前测定基础血清Gn水平， 素（total bilirubin，TBIL）、胰岛素（insulin，INS）及甘
随后给予醋酸曲普瑞林（0.1 mg/瓶）。注射剂量为 油三酯（triglyceride，TG）等指标的差异均无统计学
2.5 μg/kg，最大剂量为100 μg。分别于注射前及注射 意义。其中两组肥胖患儿 BMI 均未超过同年龄同
后30、60、90 min采集静脉血2 mL，采用免疫化学发 性别儿童 BMI 的第 97 百分位，属于轻度肥胖（P >
光法测定血清Gn水平。其余血清-80 ℃保存。 0.05，表1）。
1.2.2 脂质组学 2.2 脂质组学分析
样本提取：血清经4 ℃解冻，取50 μL加入150 μL 脂质定量值跨多数量级平滑连续稳定、质量
提取试剂，于摇床1 500 r/min涡旋混匀20 min，随后转 优，可用于后续分析。箱线图示样本组中位数、四
移至96孔板，4 ℃下2 200 g离心10 min。过滤后滤 分位距及须线范围高度一致，脂质丰度分布同质。
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液采用 C 正/负离子模式检测分析。质控（quality 以 QC 样本脂质响应强度相对标准差（relative stan⁃
control，QC）样本由等量混合样品制备。检测时样 dard deviation，RSD）≤30%过滤，剔除RSD>30%脂质
本序列随机分布，QC样本均匀穿插其中。 保证统计稳定，仅6.4%脂质因RSD过高被剔除（图1）。
LC⁃MS/MS 检测：样品在 Vanquish 超高效液相 脂质组学共鉴定出 1 880 种高置信度脂质，涉
色谱仪与Q Exactive四极杆⁃轨道阱高分辨质谱仪联 及神经酰胺（ceramide，Cer）、磷脂酰胆碱（phosphati⁃
用系统上检测，脂质经反相色谱分离后以正/负离子 dylcholine，PC）、磷脂酰乙醇胺（phosphatidylethanol⁃
+
-
（ESI /ESI ）模 式 分 析 。 色 谱 检 测 使 用 Acquity TM amine，PE）等不同脂质分类（图 2A）。分析脂质定
BEH C 柱（柱温40 ℃），洗脱液A为60%乙腈水、B为 量值相关性显示，CO⁃PPP 组内重复性及一致性较
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10%乙腈异丙醇，5 min冲洗平衡，流速0.3 mL/min。质 高，CO⁃CPP 组虽稍分散，整体仍呈较高水平正相关
谱采用加热电喷雾离子源，负离子模式优化用 （图2B）。
20%+30%阶梯归一化碰撞能量。 采用FC≥1.2和显著性水平（P < 0.05）的双重筛
组学分析：用 XCalibur Quan Browser 提取总离 选标准，鉴定出 42 种具有统计学显著性的差异脂
子流图曲线下面积（area under the curve，AUC）作脂 质，包括 18 种上调脂质和 24 种下调脂质（图 3A、
质定量信息，R/Python 编程行显著性检验与分类分 B）。下调脂质以蓝色标记，上调脂质以红色标记，
析；以差异倍数（fold change，FC）≥1.2 筛差异脂质， 无差异脂质以灰色标记。
获得上调/下调种类数量，供后续主成分分析（princi⁃ 通过相关性分析评估了差异脂质之间的代谢
ple component analysis，PCA）、聚类及相关分析。 关联性。红色表示正相关，蓝色表示负相关；颜色
1.3 统计学方法 越深，相关性程度越高（图4）。
数据分析采用 SPSS 27.0 软件。定性信息以构 脂质组学结果显示，Cer、PC、PE这3类差异脂质
成比表示，卡方检验用于两组比较。符合正态分布 或为潜在的CO⁃CPP 生物标志物。与其他组别相比，
的连续变量以均值±标准差（x ± s）表示，独立样本两 CO⁃CPP 组PC、Cer水平增加以及PE水平降低。ROC
组比较采用t检验。相关性分析采用Pearson相关分 分析示PC、PE的AUC分别为0.798和0.834（图5）。
析。非正态分布的连续变量以中位数（四分位数） 2.3 Cer与临床指标的联合分析
［M（P25，P75）］表示，比较采用 Man⁃Whitney U 检验， Cer 与 LH 基础值、INS 呈正相关且具有统计学
相关性分析采用 Spearman 秩相关分析。绘制受试 意义（P < 0.05），相关系数分别为 0.52 和 0.46，与
者工作特征（receiver operating characteristic，ROC） FSH 基础值等其余指标的相关性无统计学意义
曲线。P < 0.05为差异有统计学意义。 （P > 0.05，表2）。
ROC 曲线分析提示 Cer 的 AUC 为 0.810。选取
2 结 果
部分与肥胖、CPP 相关临床指标与 Cer 指标行联合
2.1 一般临床资料比较 预测，ROC曲线分析显示，LH基础值+Cer联合预测
两组女童在 HAZ、BA、BAI、E2、OV、UV、身高、 CO⁃CPP 的 AUC 为 0.970（表 3），高于上述其他单一
