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第46卷第7期
·974 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2026年7月

were analyzed by western blotting，and MitoTracker Red labeling was used to observe the mitochondria of neurons. Results：The
activities of leukocyte mitochondrial membrane respiratory chain complexes Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ and Ⅳ in non⁃POCD group were higher than
those in POCD group（P < 0.05）. Compared with the POCD group，mice in the POCD+ASM981 group spent less time to escape the
incubation period，crossed the platform more times，stayed in the original platform area longer，and greater distance traveled in the
target quadrant（P < 0.05）. The levels of p⁃AMPK，mito⁃Drp1 protein and calcineurin in primary neurons of the BPV+ASM981 group
were lower than those of the BPV group（all P < 0.05），while the level of p⁃Ser637⁃Drp1 protein was higher than that of the BPV group
and the length of mitochondrial branches was longer than that of the BPV group（all P< 0.05）. Conclusion：ASM981 has protective
effect on cognitive dysfunction induced by BPV in aged mice，and the mechanism may be to improve mitochondrial dysfunction by
inhibiting mitosis mediated by AMPK signaling pathway.
［Key words］ bupivacaine；calcineurin phosphatase；aged mice；mitochondria；cognitive function
［J Nanjing Med Univ，2026，46（07）：973⁃982］

术后认知功能障碍（postoperative cognitive dys⁃ （Santa Cruz Biotechnology 公司，美国）；异硫氰酸荧
function，POCD）是老年人手术麻醉后常见的神经系 光 素（FITC）标 记 的 第 二 抗 体 或 四 甲 基 罗 丹 明
统并发症 。布比卡因（bupivacaine，BPV）脂质体是 （TRITC）标记的第二抗体、ASM981（钙调神经磷酸
［1］
临床实践中常用的局部麻醉剂 。尽管BPV脂质体 酶抑制剂）（Invitrogen公司，美国）；Epon812试剂（海
［2］
诱导的神经毒性在临床实践中很少见，但证据表明， 德创业北京生物科技有限公司）；放射免疫沉淀测
其可能在老年动物模型中引起POCD，甚至永久性神 定法缓冲液、二辛可宁酸蛋白质测定试剂盒（上海
经系统疾病 ［3-4］ 。因此，有必要充分了解BPV脂质体 Beyotime 公 司），Mito Tracker Red CMXRos、Drp1、
诱导神经毒性的分子机制。越来越多的证据表明，线 Ser616 磷酸化 Drp1（p⁃Ser616⁃Drp1）抗体、AMPK 抗
粒体损伤与POCD的机制密切相关。长时间的麻醉 体、p⁃Thr172⁃AMPK（p⁃AMPK）抗体、线粒体蛋白细
暴露或手术引起的有害刺激可能损害线粒体功能，影 胞色素 c 氧化酶Ⅳ（COX Ⅳ）抗体（Cell Signaling 公
响其对神经元的能量供应，并导致细胞毒性，从而 司，美国），针对抗 Ser637 磷酸化 Drp1（p⁃Ser637⁃
［5］
导致 POCD 。研究报告称，老年大鼠在胫骨骨折 Drp1）一抗（Abcam公司，英国）；β⁃肌动蛋白一抗（北
后表现出记忆障碍，并伴有线粒体功能障碍和氧 京博奥森生物技术有限公司），辣根过氧化物酶偶
［6］
化损伤 。海马体中脂滴的积聚会加速手术后线粒 联的兔 IgG 二抗（Proteintech 公司，美国）；ECL 试剂
体的损伤 。此外，研究表明，BPV麻醉会增加线粒 盒（安 诺 伦 北 京 生 物 科 技 有 限 公 司），VersaDoc
［7］
体α⁃突触核蛋白的积聚，破坏线粒体体内平衡，并促 4000MP系统（Bio⁃Rad公司，美国）；比色钙调神经磷
［8］
进线粒体依赖性凋亡 。这些研究表明，线粒体损伤 酸酶细胞活性测定试剂盒（Calbiochem公司，德国）；
可能在BPV诱导的POCD中发挥重要作用。然而，目 白细胞线粒体膜呼吸链复合体Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ活性链
前关于这方面的报道较少。已经证明，为了应对能量 免疫吸附测定试剂盒（南京建成生物工程研究所有限
应激，AMP依赖的蛋白激酶（adenosine 5′⁃monophos⁃ 公司）；冷冻切片机（Leica公司，美国）；Olympus Ⅸ⁃81
phate⁃activated protein kinase，AMPK）诱导动力相关 荧光显微镜、FluoView Fv10i共聚焦显微镜（Olympus
蛋白 1（dynamin⁃related peptide 1，Drp1）依赖性线粒 公司，日本）；JEM 1010透射电子显微镜（JEOL公司，
体分裂 。因此，本研究通过探讨钙调神经磷酸酶抑 日本）。
［9］
制剂匹美克莫司（ASM981）是否可以通过抑制线粒体 1.2 方法
过度分裂来改善BPV诱导的老年小鼠认知障碍，旨 1.2.1 资料收集
在为老年患者POCD的预防和治疗提供新的概念和 选择 2022 年 1 月—2024 年 12 月在本院接受全
可能的干预靶点。 髋关节置换手术的 65~85 岁的美国麻醉医师协会

（American Society of Anesthesiologists，ASA）Ⅰ或Ⅱ
1 材料和方法
级的61例患者作为研究对象。纳入标准：麻醉方法
1.1 材料 均为腰麻联合 BPV 脂质体进行髋关节囊周围神经
O.C.T.化合物（SAKURA公司，日本）；抗p⁃AMPK 阻滞，术后给予芬太尼、昂丹司琼静脉电子镇痛泵
（江苏亲科生物研究中心有限公司），NeuN 抗体 自控镇痛。排除标准包括：简易精神状态检查（mini⁃