Page 34 - 南京医科大学自然版

第46卷第9期
·1304 · 南 京 医 科 大 学 学 报 2026年9月

in the striatum. Western blot analysis was used to determine TH protein levels in the striatum. In vitro，a PD cell model was
+
established by treating human neuroblastoma SH⁃SY5Y cells with 1 mmol/L 1⁃methyl⁃4⁃phenylpyridinium ion（MPP ）. Cell viability
was assessed using the CCK ⁃ 8 assay，cytotoxicity was evaluated by lactate dehydrogenase（LDH）release assay，and the protein
expression levels of Bcl⁃2 and Bax were measured by Western blotting. Results：The behavioral results showed that MPTP⁃treated mice
displayed a significantly reduced latency to fall during the pole test，accompanied by an increased total descent time，suggesting the
establishment of Parkinsonian⁃like motor impairment. Immunofluorescence analysis showed that ReN⁃NV alleviated the loss of TH⁃
positive neurons in the substantia nigra and striatum induced by MPTP and reduced Iba1 expression in the substantia nigra，with RVG⁃
ReN⁃NV exhibiting a more pronounced protective effect. Western blot analysis demonstrated that ReN⁃NV upregulated TH protein
+
expression in the striatum. In vitro experiments showed that ReN⁃NV increased the viability of MPP ⁃treated SH⁃SY5Y cells，reduced
LDH release，upregulated the expression of the anti⁃apoptotic protein Bcl⁃2，and downregulated the expression of the pro⁃apoptotic
+
protein Bax. Conclusion：ReN cell⁃derived nanovesicles exert significant neuroprotective effects in MPTP/MPP ⁃induced PD models.
RVG modification further enhances their brain⁃targeting protective efficacy，and the underlying mechanism may be associated with
let⁃7i⁃5p⁃mediated inhibition of apoptotic pathways.
［Key words］ exosomes；Parkinson’s disease；nanovesicles；rabies virus glycoprotein peptide
［J Nanjing Med Univ，2026，46（09）：1303⁃1314］

帕金森病（Parkinson’s disease，PD）又称震颤麻 血⁃脑屏障的优势，而且制备过程相对简单，产量约
痹，是一种常见于中老年人的神经退行性疾病，其 为天然外泌体的 100 倍。此外，通过挤压法制备的
病变主要位于黑质与纹状体区域。研究表明，高龄 NV 具有较高的粒径均一性和良好的稳定性 ［14］ 。为
是 PD 的重要发病因素之一。随着年龄增长，纹状 实现更精准的中枢神经系统靶向递送，研究人员常
体多巴胺神经元逐渐发生退行性变，同时过氧化氢 对囊泡表面进行功能化修饰。狂犬病病毒糖蛋白
酶活性降低，导致体内氧化过程加速，多种因素共 （rabies virus glycoprotein，RVG）是狂犬病病毒膜上
同作用使得PD发病率显著上升 ［1-2］ 。目前，PD的治 插入的一个 65 kDa 的三聚体Ⅰ型糖蛋白 ［15］ 。RVG
疗主要依赖药物干预，常用药物包括左旋多巴和多 肽是从RVG 受体识别关键序列中衍生的由29个氨
巴胺受体激动剂等 ［3-4］ 。然而，该类治疗多为对症治 基酸组成的短肽，具有低免疫原性，可与不同来源
疗，长期疗效有限。其重要原因之一在于多巴胺本 的外泌体结合，介导其中枢神经系统靶向递送，增
身无法透过血脑屏障，临床上需依赖其前体左旋多 加受体细胞摄取，减少药物脱靶效应等优点 ［16-17］ 。
巴进入中枢神经系统后再转化为多巴胺，从而发挥 因此，使用外泌体及其仿生囊泡探索PD发病机制、
作用。此外，丘脑下核深部脑电刺激也是一种治疗 挖掘潜在的治疗靶点，成为当前研究的热点。研究
PD并发运动波动和运动障碍的有效方法，其作用机 表明，NV 内富含微小 RNA（microRNA，miRNA） ，
［18］
制是通过改善左旋多巴反应性运动体征，以减少药 而miRNA在包括PD在内的多种神经退行性疾病的
［5］
物的使用，从而减轻左旋多巴诱导的运动障碍 。 发病机制中发挥重要作用。miRNA 不仅可能作为
近年来的研究表明，外泌体在 PD 小鼠模型中具有 PD 的诊断标志物，靶向特定 miRNA 也可能成为 PD
显著的神经保护作用，可有效减轻疾病相关的病理 的潜在治疗策略 ［19］ 。ReNcell VM 细胞（下文简称
［6］
损伤 。外泌体是一类直径 30~200 nm 的小型囊 ReN 细胞）是一种源自人类胎儿大脑腹侧中脑区域
泡，内含 DNA、RNA、蛋白质等多种生物因子 ［7-8］ ，并 的神经祖细胞系，具有良好的干细胞特性，即使在
能够穿透血⁃脑屏障 ［7，9］ 。研究发现，外泌体在免疫 长时间传代（>45代）后仍能保持正常的二倍体核型
调节 ［10］ 、炎症反应调控 ［11］ 以及神经修复 ［12］ 等生理和 和分化潜能 ［20］ 。鉴于ReN细胞的上述特性，以及干
病理过程中发挥着关键作用。然而，外泌体在临床 细胞在PD 治疗中已展现出的广阔应用前景和潜在
转化应用中仍面临重要挑战，主要原因是其从供体 疗效 ［21］ ，本研究通过挤压法制备 ReN 细胞来源的
细胞中分离获得的产量极为有限 ［13］ 。基于此，具有 NV（ReN⁃NV），并进一步经 RVG 肽修饰获得 RVG⁃
外泌体相似结构和生物学功能的外泌体模拟纳米 ReN⁃NV；借助小鼠及细胞PD模型，评估两种囊泡的
囊泡（nanovesicle，NV）作为一种人工制备的仿生囊 神经保护作用，并探究其分子机制，为 ReN⁃NV 和
泡逐渐受到关注。该NV不仅保留了外泌体可穿透 RVG⁃ReN⁃NV在PD治疗中的应用提供新证据。