Page 27 - 南京医科大学学报自然科学版
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第41卷第12期 彭丹丹,李 言. MicroRNA⁃190调控衰老相关的脂肪能量代谢稳态[J].
2021年12月 南京医科大学学报(自然科学版),2021,41(12):1728-1734 ·1733 ·
A B C
PRDM16 3′UTR 2.0
miR⁃190⁃5p: 3′…UGGAUUAUAUAGUUUGUAUAGU…5′ 1.5 Ctrl
miR⁃190 1.5 *
human: 5′…AAAACACUUGCCUGAAUACAUAUCACGUAU…3′ *
mouse: 5′…GAAGCACUUGCUUAAAUACAUAUCACGUAU…3′ 1.0 PRDM16相对表达量 1.0
rat: 5′…GAAGCACUUGCUCAAAUACAUAUCACGUAU…3′ RLU *
dog: 5′…AAAGCACUUGCCCAAAUACAUAUCACCCGU…3′ 0.5 0.5
D E
Ctrl miR⁃190 Ant⁃Ctrl Ant⁃190 0
0
PRDM16 95 kDa PRDM16 95 kDa WT Mutant Ctrl miR⁃190 Ant⁃Ctrl Ant⁃190
Tubulin 55 kDa Tubulin 55 kDa
A:PRDM16上miR⁃190的结合位点;B:荧光素报告基因实验验证miR⁃190对293T细胞(WT)和结合位点突变质粒(Mutant)中PRDM16的
作用(与Ctrl比较,P < 0.05,n=6);C:过表达或敲减miR⁃190对脂肪细胞中PRDM16的RNA表达水平的影响(两组比较,P < 0.05,n=6);D:过
*
*
表达miR⁃190对脂肪细胞中PRDM16蛋白表达水平的影响;E:敲减miR⁃190对脂肪细胞中PRDM16蛋白表达水平的影响。
图5 PRDM16是miR⁃190的靶基因
Figure 5 PRDM16 is the target gene of miR⁃190
A C
Ctrl Aged Aged+Ant⁃190
0.8 * ** * Ctrl
( kcal/h) 0.6 * Aged
Aged+Ant⁃190
能量消耗 0.4 iWAT
0.2
0
Light Dark
B
5 000 * * Ctrl
( kg/hr ) 4 000 * * Aged iBAT
Aged+Ant⁃190
3 000
耗氧量mL/ 2 000
1 000
0
Light Dark
D E
1.5 1.5
Ctrl
* * * * ** ** * ** Aged
* ** ** * 1.0 * * ** * Aged+Ant⁃190
相对表达量 0.5 相对表达量 0.5
1.0
0 0
UCP1 PRDM16 DIO2 CIDEA UCP1 PRDM16 DIO2 CIDEA
A:衰老小鼠敲减miR⁃190对能量消耗的影响;B:衰老小鼠敲减miR⁃190对耗氧量的影响;C:敲减miR⁃190对衰老小鼠脂肪组织形态的影
响(HE,×40);D:衰老小鼠敲除miR⁃190对褐色脂肪组织中产热基因的影响;E:衰老小鼠敲除miR⁃190对白色脂肪组织中产热基因的影响(两
组比较,P < 0.05,P < 0.01(n=6)。
**
*
图6 miR⁃190敲减对衰老小鼠的影响
Figure 6 Influence of miR⁃190 knock⁃down on aging mice
代谢稳态的调控,miR⁃190通过抑制PRDM16的表达 合,说明 miR⁃190 与衰老呈正相关性。由于在衰老
导致脂肪细胞产热降低从而导致了能量代谢紊乱。 进程中,产热减少,因此进一步向褐色脂肪细胞和
本研究首先通过RT⁃PCR发现衰老小鼠的褐色 白色脂肪细胞中过表达 miR⁃190,并对相关产热基
脂肪组织和白色脂肪组织中miR⁃190的表达水平均 因进行RT⁃PCR,结果表明过表达miR⁃190均会导致
是升高的,并且体外衰老模型的结果也与之相吻 产热基因的表达降低,说明 miR⁃190 抑制脂肪细胞