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第41卷第3期 须怀沙，王易欣，陈旭锋，等. 甲基苯丙胺引起BV2小胶质细胞炎性反应：基于Toll样受体⁃Peli1信号
2021年3月 通路的研究［J］. 南京医科大学学报（自然科学版），2021，41（03）：324-330 ·327 ·

A B C D
TLR4蛋白相对表达量 1.0 TLR7蛋白相对表达量 TLR8蛋白相对表达量 1.0
0 100 300 900 （μmol/L） 2.0 2.5 2.0
TLR4 100 kDa 1.5 ** ** ** 2.0 * *** ** 1.5 ** *
TLR7 121 kDa 1.5 *
TLR8 120 kDa 1.0
β⁃actin 43 kDa 0.5 0 0.5 0 0.5 0
100
300
900
900
300
100
900
300
100
0
Meth（μmol/L） 0 Meth（μmol/L） 0 Meth（μmol/L）
E F G
0 h 6 h 12 h 24 h 48 h 4 2.0
TLR7蛋白相对表达量 2 ** ** TLR8蛋白相对表达量 1.0
TLR7 121 kDa 3 ** ** 1.5 * ** *
TLR8 120 kDa
β⁃actin 43 kDa 1 0.5
0
0 h 6 h 12 h 24 h 48 h 0 0 h 6 h 12 h 24 h 48 h
A：0、100、300、900 μmol/L Meth处理BV2细胞24 h，TLR4、TLR7、TLR8蛋白表达的变化；B~D：TLR4（B）、TLR7（C）、TLR8（D）蛋白表达变化
的统计图。E：300 μmol/L Meth处理BV2细胞0~48 h，TLR7、8蛋白表达的变化；F、G：TLR7（F）、TLR8（G）蛋白表达变化的统计图。与对照组相
比，P < 0.05，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。
*
**
***
图2 Meth对小胶质细胞TLR家族蛋白表达水平的影响
Figure 2 Effects of Meth on the expression of Toll like receptor family proteins in BV2 cells
A 0 100 300 900（μmol/L） B C 0 h 6 h 12 h 24 h 48 h D
TLR3蛋白相对表达量 1.0 β⁃actin 43 kDa TLR3蛋白相对表达量 0.5
TLR3 108 kDa 2.0 * ** TLR3 108 kDa 1.5 ** *
1.5
β⁃actin 43 kDa ** 1.0
0.5
0
100
0
900
300
Meth（μmol/L） 0 0 h 6 h 12 h 24 h 48 h
E 0 100 300 900（μmol/L） F G 0 h 6 h 12 h 24 h 48 h H
TLR11蛋白相对表达量 2 1 ** β⁃actin 43 kDa 2 **
TLR11 90 kDa 5 ** *** TLR11 90 kDa 4 **
β⁃actin 43 kDa 4 3 1 蛋白相对表达量 3 ** **
0
300
100
0
Meth（μmol/L） 900 TLR11 0 0 h 6 h 12 h 24 h 48 h
A、B：不同浓度Meth处理BV2细胞24 h，TLR3蛋白表达的变化（A）及统计图（B）；C、D：300 μmol/L Meth处理BV2细胞0、6、12、24、48 h后，
TLR3 蛋白表达的变化（C）及统计图（D）；E、F：不同浓度 Meth 处理 BV2 细胞 24 h，TLR11 蛋白表达的变化（E）及统计图（F）；G、H：300 μmol/L
Meth处理BV2细胞0、6、12、24、48 h后，TLR11蛋白表达的变化（G）及统计图（H）。与对照组相比，P < 0.05，P < 0.01（n=3）。
*
**
图3 Meth对小胶质细胞TLR3和TLR11蛋白的调节作用
Figure 3 Effects of Meth on expression of TLR3 and TLR11 proteins

质细胞中 Peli1 蛋白表达的影响。300 μmol/L Meth ⁃6的表达，而 Peli1 干扰后，TNF⁃α及 IL⁃6 分泌降低
处理BV2细胞0、15 min、30 min、1 h、3 h、6 h、12 h和 （图6B~D）。此外，在mRNA水平，Peli1的敲减同样
24 h，Peli1 蛋白表达随时间逐渐升高，3 h 达到峰值 缓解了Meth 引起炎性因子iNOS 及TNF⁃α mRNA 表
后有下降趋势，但均高于未处理组（P < 0.05，图5）。 达的增多（图6E、F）。

2.5 Peli1 对 Meth 引起小胶质细胞炎性因子表达、 基于上述Peli1下调可明显逆转Meth 促进炎性
释放及NF⁃κB通路的影响 递质产生的现象，观察了炎性调节的关键通路 NF⁃
TLR4是唯一可以同时介导MyD88及TRIF通路 κB 的激活情况。Peli1 干扰 24 h 后，Meth 作用 BV2
［7］
的TLR ，因此，本研究观察了TLR4及Peli1在Meth 细胞30 min，NF⁃κB被显著激活，而将Peli1下调后，
引起炎性反应中的作用。Peli1经siRNA干扰后，蛋 Meth引起NF⁃κB的激活情况被明显逆转，差异有统
白表达量明显降低（图6A）；Meth暴露促进TNF⁃α及IL 计学意义（图7）。