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第42卷第3期 陈 亮，柏 洁，郑扣龙. KLF2在急性冠脉综合征中的作用研究［J］.
2022年3月 南京医科大学学报（自然科学版），2022，42（03）：345-351 ·347 ·

表1 PCR引物序列 1.3 统计学方法
Table 1 The sequences of PCR primers 所有实验重复至少 3 次。采用 SPSS22.0 进行
引物 引物序列（5′→3′） 统计学分析，对服从正态或近似正态分布的计量资
KLF2 上游：ACAGACTGCTATTTATTGGACCTTAG
料采用均数±标准差（x ± s）进行统计描述，多组间
下游：CAGAACTGGTGGCAGAGTCATTT
比较采用单因素方差分析；计数资料采用率（%）进
GADPH 上游：TGAAGGTCGGAGTCAACGGATT
行描述，多组间比较采用卡方检验，组间两两比较
下游：CCTGGAAGATGGTGATGGGATT
采用 Bonferroni 法调整。P＜0.05 为差异有统计学
余部分血浆相应体积的PBS缓冲液稀释，混匀，加入 意义。
5倍体积的红细胞裂解液，适量PBS缓冲液洗涤2次，
2 结 果
100 μL PBS缓冲液重悬细胞，即为PBMC悬液。
1.2.5 流式细胞术 2.1 基本特征

在 PBMC 悬液中，先加入 Fc 受体阻断剂，抗⁃ 各组患者的临床特征如表 3 所示。各组在年
CD16/32，孵育10 min阻断非特异性结合后，再加入 龄、性别、吸烟史、糖尿病、低密度脂蛋白（low densi⁃

流式抗体，抗人 CD3 及抗人 CD8 标记 T 细胞群，PE ty lipoprotein，LDL）、肾功能（creatinine，Cr）等临床指
标记抗人CD62L、PE⁃Cyanine7标记抗人CCR7、APC 标上差异无统计学意义（表3）。
标记抗人CXCR3、异硫氰酸荧光素（FITC）标记抗人 2.2 KLF2基因在各组中的表达情况
CD44（eBioscience公司，美国）。避光孵育15 min后， 为了探讨KLF2基因是否参与了ACS 的炎性反
加入 1 mL PBS 洗细胞，400 g 离心 5 min 后，400 μL 应过程，分别采用Western blot和qRT⁃PCR方法检测
PBS重悬，待上机检测。 外周血中 KLF2 蛋白（图 1A）和 mRNA（图 1B）在各
1.2.6 Gensini评分 组的表达水平，结果见 KLF2 mRNA 和蛋白水平在
Gensini评分又称冠状动脉评分，是用于量化急 ACS 组中均显著减低，STEMI 组和 NSTEMI 组 KLF2
性心肌梗死严重程度、制定治疗方案及评估预后的 基因的表达量明显低于 UA 组及对照组，且 STEMI
重要指标（表2）。 组外周血中的KLF2水平低于NSTEMI组。
表2 Gensini评分表 检测 NSTEMI 组、STEMI 组治疗前后外周血中
Table 2 Gensini Score KLF2 蛋白（图 2A）及 mRNA（图 2B）表达水平，发现
狭窄程度 评分 病变部位 评分 NSTEMI 组及 STEMI 组的患者外周血中 KLF2 表达
1%~25% 01 左主干 5.0 水平较治疗前明显增加，STEMI 组中 KLF2 变化更
＞25%~50% 02 左前降支或回旋支近段 2.5 大；上述结果表明 KLF2 不仅在 ACS 中发挥着重要
＞50%~75% 04 左前降支中段 1.5 作用，并且在急性心肌梗死中的作用更明显。
＞75%~90% 08 左前降支远段或左回旋支中、远段 1.0
2.3 KLF2基因可减轻ACS的炎性反应
＞90%~100% 16 右冠状动脉 1.0
越来越多的研究发现，KLF2 广泛表达于各种
＞100% 32 小分支 0.5
组织，编码转录激活剂和阻遏蛋白 ［12］ ，尤其在 T 淋
每处病变的积分=狭窄程度评分×病变部位评分；每位患者的积
分为所有病变积分之和。 巴细胞激活、分化、增殖、凋亡和迁移等方面扮演

表3 各组临床资料比较
Table 3 Comparison of clinical data in each group

ACS组 对照组
指标 P值
STEMI组（n=40） NSTEMI组（n=38） UA组（n=45） （n=45）
年龄（岁） 65.1 ± 14.1 65.5 ± 12.0 65.0 ± 12.0 64.1 ± 9.50 0.557
男性［n（%）］ 30（75.0） 30（78.9） 30（66.7） 27（0.6）0 0.129
吸烟［n（%）］ 25（62.5） 28（73.7） 27（60.0） 25（55.6） 0.284
高血压［n（%）］ 26（65.0） 23（60.5） 31（68.9） 31（68.9） 0.715
糖尿病［n（%）］ 10（25.0） 11（28.9） 09（20.0） 05（11.1） 0.085
LDL（mmol/L） 2.8 ± 1.1 2.9 ± 1.0 2.6 ± 0.9 2.6 ± 0.7 0.335
Cr（μmol/L） 76.8 ± 36.8 76.0 ± 25.7 75.5 ± 27.3 69.7 ± 19.4 0.187