Page 27 - 南京医科大学学报自然科学版

第43卷第5期 付 鑫，吴 茗，陈 献，等. mTOR信号通路在调控卵巢癌CD4 Treg糖代谢中的作用［J］.
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2023年5月 南京医科大学学报（自然科学版），2023，43（5）：604-610 ·609 ·

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A B 细胞以及记忆性CD8 T细胞的生成，并在Treg细胞
250 25 ***
** 的稳定和激活中发挥重要作用 ［15-16］ 。为满足与T细
（ pmol ） 200 （ mM/L） 20 胞激活相关的能量需求，T 细胞受体和共刺激信号
以及细胞因子通过上游 PI3K/AKT 信号网络调整
150
15
2⁃脱氧葡萄糖 100 L⁃乳酸 10 mTOR 通路，mTOR 促进 T 细胞代谢的关键转录调
控因子 HIF⁃1α，SREBP 等表达，进而驱动包括与糖
5
50
酵解、磷酸戊糖途径、脂质或固醇合成等过程的代
谢基因的表达来调节 T 细胞代谢 ［17］
0 0 。然而，mTOR
Treg+雷岶霉素 Treg+雷岶霉素 信号通路是否在调控卵巢癌生长环境中 CD4 Treg
Treg
Treg
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的糖代谢中发挥重要作用仍待研究。
两组比较，P < 0.01， P < 0.001（n=3）。 本研究从卵巢癌患者外周血中 mTOR 的 CD4 +
**
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图 3 SKOV3 生长环境中阻断 mTOR 信号前后 CD4 Treg Treg的百分比变化情况入手，结果表明，卵巢癌患者
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的糖摄取（A）和糖酵解（B）水平 外周血中mTOR 的CD4 Treg比例升高，为进一步探
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Figure 3 The glucose uptake（A）and glycolysis（B）levels 究其作用，构建了 SKOV3 与 CD4 Treg 的共培养体
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of CD4 Treg before and after blocking mTOR 系，结果与临床样本结果相符合，与 SKOV3 共培养
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signals in SKOV3 growth environment
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组mTOR 的CD4 Treg比例也升高，且上调的mTOR
酶 ［11］ 。mTOR信号通路在促进细胞生长、导致凋亡、 信号通路相关基因和蛋白的结果说明在卵巢癌生
加速血管生成、介导自噬等过程中发挥着极其重要 长环境中，CD4 Treg的mTOR信号通路发生明显活
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的生物学功能 ［12］ ，其在肿瘤中通常被激活，与肿瘤 化。为了进一步探究 mTOR 信号通路是否在 CD4 +
的发生发展密切相关 ［13］ 。越来越多的证据表明 Treg 糖代谢中发挥作用，本研究使用雷帕霉素抑制
mTOR 信号传导参与了多种免疫细胞的功能调节， 细胞的 mTOR 信号激活。结果表明，雷帕霉素处理
也是决定 T 细胞命运的主要参与者 ［14］ ，且 mTOR 信 过的CD4 Treg的糖摄取和糖酵解水平显著下降，糖
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号 在 每 个 T 细 胞 亚 群 中 都 有 着 不 同 的 作 用 ， 代谢相关基因和蛋白表达明显下调。
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mTORC1 激活促进 Th1、Th2、Th17 和效应性 CD8 T 免疫代谢已经成为肿瘤免疫治疗研究的一个
A B
Treg Treg Treg+雷岶霉素
1.5 * Treg+雷岶霉素 ** * ** ** ** GLUT1 60 kDa
mRNA相对表达量 1.0 HIF⁃1α 60 kDa
*
*
PKM2
37 kDa
LDH⁃α
0.5
120 kDa
0.0 GAPDH 37 kDa
Glut1 Glut3 HIF⁃α LDH PKM2 GPI Eno1 TPI
C 0.8 * D 0.6 ** E 0.8 ** F 0.6 *
GLUT1蛋白相对表达量 0.6 PKM2蛋白相对表达量 0.4 LDH⁃α蛋白相对表达量 0.6 HIF⁃1α蛋白相对表达量 0.4

0.4
0.4
0.2
0.2
0.2
0.2
0.0
Treg+雷岶霉素 0.0 Treg+雷岶霉素 0.0 Treg+雷岶霉素 0.0 Treg+雷岶霉素
Treg
Treg
Treg
Treg
A：RT⁃PCR；B~F：Western blot检测及数据定量分析。两组比较，P < 0.05，P < 0.01（n=3）。
*
**
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图4 阻断CD4 Treg的mTOR信号后其糖代谢相关基因和蛋白表达水平
Figure 4 The expression levels of glucose metabolism ⁃ related genes and proteins of CD4 Treg cells after blocking the
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mTOR signal of CD4 Treg
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