Page 12 - 南京医科大学学报自然科学版
P. 12

第43卷第7期
               ·898 ·                            南 京    医 科 大 学 学         报                        2023年7月


              A           Sycp1                  Hormad1                 Kdm1a                  Hnrnpa2b1
                               6 868                                  87      82
                                                                      87
                                                   338
              9 000  4 958           10 000  445   338         400                    4 000
              6 000                   5 000                    200                           314   199
              3 000                      0                      0                     2 000
                 0  包囊    731             包囊    2 704            包囊         127         0
                  包囊
              6 000  2 239      2 817  2 000  148  122         300    57      60                 1 317
              4 000                   1 000                    200                    4 000  478   321
              2 000                      0                     100                    2 000
                 0                                              0                       0
                  包囊破裂                    包囊破裂1 064              包囊破裂      89            包囊破裂   917
                  包囊破裂 1 394
                                1 109              104                70      67
              6 000  924              1 500  124               200                    4 000  487   358
              4 000                   1 000                    100                    2 000
              2 000                    500                      0                       0
                 0  卵泡形成  2 444          0 卵泡形成551               卵泡形成      53            卵泡形成    744
                                                                      136577500
                   102931700 102931900 102932100 95585200 95585400 95585600 95585800  136577500 136578000136578000  51467200 51467400 51467600
                    ENSMUST00000199930.1    ENSMUST00000107154.3    ENSMUST00000116273.8   ENSMUST00000204158.2
                    ENSMUST00000196988.4    ENSMUST00000029754.12    ENSMUST00000105847.7  ENSMUST00000203954.2
                          Mael                    Gtsf1                   Eif4a2                  Ncl
                         4 093   4 027
              7 500                     90     73              1 500                  4 000
              5 000                     60                  14 1 000          361           210
              2 500                     30                      500    67             2 000
                 0 包囊                    0 包囊                    0                       0
                       4 250  7  4 144              8             包囊       187            包囊      723
              7 500                   1 000                     600
              5 000                    500     35           7   400           174     3 000  233
                                                                                      2 000
              2 500                      0                      200    48             1 000
                 0  包囊破裂     7            包囊破裂      94           0 包囊破裂    91            0
                         1 406   1 358 1 500                    300                       包囊破裂     679
              2 000                   1 000   107               200    31     80      6 000
                                                                                      4 000
              1 000                    500                 15   100                   2 000  77
                 0 卵泡形成     2            0 卵泡形成    132           0 卵泡形成    87            0 卵泡形成    1 083
                166226600 166227000  166227400  103428400  103428700  23108800 23109000 23109200  86358200 86358600 86359000
                    ENSMUST00000194057.5    ENSMUST00000153930.7     ENSMUST00000232287.1  ENSMUST00000185785.1
                    ENSMUST00000038782.3    ENSMUST00000129837.1    ENSMUST00000168891.7  ENSMUST00000185676.6
              B  1.5     Sycp1            0.8    Hormad1           1.0     Kdm1a            0.8    Hnrnpa2b1
                同源异构体相对表达水平  1.0 0  E17.5 P0.5  P2.5  同源异构体相对表达水平  0.6 0  E17.5 P0.5 P2.5  同源异构体相对表达水平  0.8 0  E17.5 P0.5 P2.5  同源异构体相对表达水平  0.6 0  E17.5 P0.5 P2.5
                                                                                                          *
                                                                                 **
                                                                             **
                                                                   0.6
                                                    **
                                                                                            0.4
                                          0.4
                                                        **
                                                                   0.4
                           ** **
                 0.5
                                                                                            0.2
                                          0.2
                               **
                                                                   0.2
                同源异构体相对表达水平  1.0  Mael   同源异构体相对表达水平  0.4  Gtsf1  **  同源异构体相对表达水平  1.0  Eif4a2  同源异构体相对表达水平  1.0  Ncl  E17.5
                                                    **
                                                                                            0.8
                                                                   0.8
                                                                                                          P0.5
                  0.8
                                          0.3
                                                                             **
                                                                                                          P2.5
                                                                   0.6
                                                                                            0.6
                  0.6
                                          0.2
                                                                   0.4
                                                                                            0.4
                  0.4
                                                                                                          **
                                          0.1
                                                                                                            **
                                                                   0.2
                                                                                            0.2
                  0.2
                                                                    0
                   0
                                                                                             0
                                            0
                                                        P2.5
                                                                                 P2.5
                               P2.5
                                                                                                 AF1
                     E17.5 P0.5
                                                                       E17.5 P0.5
                                              E17.5 P0.5
                                                                                                          AF2
                 A:桑基图可视化可变剪切事件,图中曲线连接的地方代表剪切位点,横向坐标表示基因组坐标,纵向刻度表示对应的测序深度分布,曲线
              旁数字代表检测到的比对到该区域的reads数目;B:PCR荧光灰度值分析E17.5、P0.5、P2.5时期可变剪切基因的同源异构体相对表达水平,与
              E17.5比较,P < 0.05,P < 0.01(n=3)。
                      *
                             **
                                          图4  代表性差异可变剪切基因的可视化及PCR验证
                        Figure 4  Sashimiplots and PCR validation of representative differential alternative splicing genes
              类型特异性的方式产生一个以上独特的 mRNA 种                          间检测到广泛的可变剪切事件,尤其是卵泡期检测
              类 。可变剪切是多细胞真核生物转录组高度复                             到了最多的可变剪切事件,其中包囊到包囊破裂和
                [9]
              杂的重要原因,丰富了蛋白质和表型性状的多样                             包囊破裂到卵泡期分别富集了 893 和 2 529 个 DAS
              性 [22] 。小鼠基因组中的绝大多数(89%)蛋白质编                      事件。这表明卵泡期的可变剪切较为活跃,为卵泡
              码基因都经历了可变剪切              [13] 。目前对大量细胞            的功能性基因表达或蛋白多样性提供了支持。本研
              RNA⁃seq 数据的可变剪切研究较多,只有较少的研                        究数据也显示了可变剪切基因沿着发育轨迹的动
              究集中在单细胞水平上。                                       态表达模式。这表明单细胞亚型多样性影响蛋白
                  本研究在卵泡组装过程的细胞发育阶段转换之                          的编码谱,进而影响卵泡形成过程中的细胞分化。
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