Page 55 - 南京医科大学自然版

第46卷第10期 刘怡珂，李超凡，宋海燕，等. 鞣花酸靶向miR⁃18a/TSP⁃1轴减轻缺血性脑损伤［J］.
2026年10月 南京医科大学学报（自然科学版），2026，46（10）：1479-1491 ·1485 ·

减轻这些病理改变（图 3B）。TUNEL 染色显示， MCAO 组缺血半球Bcl⁃2表达减少，而Bax 的表达增
MCAO 组 TUNEL 阳性细胞显著多于 Control 组（P < 多；与 MCAO 组相比，EA 预处理显著上调了缺血半
0.01）；EA 预处理可减少缺血脑组织中的凋亡细胞 球Bcl⁃2的表达，同时下调了Bax的表达（P均<0.05，
数量（图 3C、D）。WB 结果显示，与 Control 组相比， 图3E~G）。

A B Control MCAO EA+MCAO

4
Neurological deficit score 3 2 ▲ ▲ ▲ ▲ △ * * C Control MCAO EA+MCAO

△

1
MCAO
▲ Control ▲ *
EA+MCAO
*
0
1 3 7 10
Time post⁃MCAO（d）

D 150 E F 1.5 G 1.5

E **
** * △
100 Control MCAO EA+MCAO 1.0 * △ 1.0
（%） * △ Bcl⁃2 26 kDa protein expression ** Bax protein expression
TUNEL 50 0.5 0.5
Bcl⁃2
Bax
21 kDa
β⁃actin 42 kDa
0 0 0
Control MCAO Control MCAO Control MCAO
EA+MCAO
EA+MCAO
EA+MCAO
A：Neurological deficit scores were evaluated at 1，3，7，and 10 days post⁃MCAO using the Longa scale. B：Representative H，E staining images
showing pathological changes in the ischemic penumbra（×100）. C，D：TUNEL staining for the detection of apoptotic cells：representative images
（C，×200）and quantitative analysis（D）. E-G：Western blot analysis of apoptosis⁃related proteins in brain tissue：representative images（E），and
quantitative analysis of Bcl⁃2（F）and Bax（G）protein expression. β⁃actin was used as a loading control. Compared with the control group，P < 0.05，
*
** △ △△
P < 0.01；compared with the MCAO group，P < 0.05， P < 0.01（n=6）.
图3 EA预处理可改善MCAO大鼠神经功能并减轻脑缺血损伤
Figure 3 EA pretreatment ameliorates neurological function and mitigates cerebral ischemic injury in MCAO rats

2.4 EA调控缺血后miRNA表达谱及生物信息学预测 整合 miRWalk、TargetScan 及 StarBase 这 3 个独
从MCAO 组和EA+MCAO 组分别随机选取3只 立数据库的预测结果，通过交叉分析筛选出27个高

造模成功的大鼠，采集缺血半暗带脑组织进行miRNA 置信度潜在靶基因（图4B）。通过 Metascape 在线数
微阵列分析。每只大鼠作为 1 个独立生物学重复， 据库对潜在目标基因进行 GO 功能富集分析显示，

样本间未进行混合。与 MCAO 组相比，EA+MCAO 这些目标基因富集于“生物过程调控”“发育过程”
组缺血半暗带脑组织的 miRNA 表达谱发生明显改 “细胞过程”及“免疫/节律调控”等（图 4C），提示
变。按照FC > 2.0 或 FC < 0.5，且P < 0.05的筛选标 miR⁃18a可能通过多条通路参与内皮稳态与缺血后
准，共获得9个差异表达miRNA，其中miR⁃18a的上 修复的调控。综合 29 次 CLIP 实验检测到互作分

调幅度最为明显（图4A），提示miR⁃18a可能参与EA 析 ，靶 标 介 导 的 miRNA 降 解 评 分（TDMDScore）
对缺血性脑损伤的保护作用。 1.018，以及跨物种保守性（phyloP 4.004），3′⁃UTR含